Inventory number IRN Number of state registration
0322РК00723 AP09260362-KC-22 0121РК00164
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 1
International publications: 1 Publications Web of science: 1 Publications Scopus: 1
Patents Amount of funding Code of the program
0 22861695 AP09260362
Name of work
Генно-инженерное создание растений люцерны посевной (Medicago Sativa L.) для фиторемедиации почв, загрязненных пестицидами
Type of work Source of funding Report authors
Applied Хамзина Салтанат Рашидовна
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Объектом исследования является люцерна посевная (Medicago Sativa L.).

Зерттеу объектісі кәдімгі жоңышқа (Medicago Sativa L.) болып табылады.

Целью проекта является генно-инженерное создание растений люцерны посевной (Medicago Sativa L.)для повышения эффективности фиторемедиации почв, загрязненных пестицидами.

Жобаның мақсаты - пестицидтермен ластанған топырақ фиторемидиациясы үшін генді-инженерлік әдістермен жоңышқа (Medicago Sativa L.) өсімдігін алу болып табылады.

В работе применены методы Agrobacterium-опосредованной трансформации люцерны посевной с помощью генно-инженерной конструкции pSRB-CYP450.

Зерттеу жұмысында гендік-инженерлік құрылым pSRB-CYP450 көмегімен кәдімгі жоңышқаның Agrobacterium-трансформациясына негізделген әдістер қолданылды.

Agrobacterium-опосредованная трансформация гетерогенных каллусов люцерны посевной оптимизирована с помощью репортерного гена, кодируемого бинарным вектором pSRB-CYP450. С помощью мониторинга транзиентной экспрессии репортерного гена выявлена низкая компетентность клеток изучаемого сорта люцерны к агробактериальной трансформации, тем не менее, выявлено, что ацетосирингон в концентрации 100 мкМ, суспензия бактерий при О.П.=0,3 и 48 часовая ко-культивация с бактерией является оптимальными для Agrobacterium–опосредованной трансформации каллусов люцерны. Селекция трансформированных клеток и изучение особенностей регенерации растений из трансформированных клеток люцерны посевной проводятся в культуре in vitro. В качестве селективного агента используется фосфинотрицин (РРТ), устойчивость к которому обеспечивается геном bar, который входит в состав конструкции pSRB-CYP450. Проведена оптимизация среды В5 по гормональному составу. Всего трансформированы 126 чашек Петри (более 3000 шт) каллусов, из них 235 подверглись некрозу на селективной среде с РРТ. Морфогенные трансформированные каллусы пассированы на 4 варианта питательной среды (В5-1, В5-2, В5-3, В5-4) для регенерации растений. В ходе проведённых экспериментов определена, что вариант В5-2 является наиболее оптимальной питательной средой для регенерации трансформированных каллусов люцерны. Эксперименты продолжаются.

Agrobacterium-жанама трансформациясына негізделген кәдімгі жоңышқаның гетерогенді каллустары pSRB-CYP450 бинарлы векторымен кодталған репортер генінің көмегімен оңтайландырылды. Шортанды 2 жоңышқа сортының каллусын агробактериалды трансформациялау ко-инокуляция и ко-культивация жасау арқылы жүргізілді. Репортер генінің транзиентті экспрессиясын бақылай отырып, зерттелетін жоңышқа сортының жасушаларының агробактериалды трансформацияға қабілетінің төмендігі анықталды, алайда 100 мкм концентрацияда ацетосирингон, О.П. = 0,3 және бактериямен бірге 48 сағаттық ко-культивация, кәдімгі жоңышқа каллустарының агробактериямен трансформациясы үшін оңтайлы екендігі анықталды. Трансформацияланған жасушалардың селкциясы және кәдімгі жоңышқаның трансформацияланған жасушаларынан өсімдік регенерациясының ерекшеліктерін зерттеу жұмыстары in vitro культурасында жүргізіледі. Фосфинотрицин (PPT) селективті агент ретінде пайдаланылады және селективті агентке төзімділік pSRB-CYP450 құрылымының бөлігі болып табылатын bar генімен қамтамасыз етіледі. Гормоналды құрам бойынша B5 одан әрі оңтайландырылды. Барлығы 126 Петри табақшасы (3000 данадан астам) каллус трансформацияланды, оның 235-і PPT бар селективті ортада некрозға ұшырады. Өсімдік регенерациясы үшін трансформацияланған каллустар қоректік ортаның 4 нұсқасына ауыстырылды. Тәжірибе барысында В5-2 нұсқасы трансформацияланған жоңышқа каллусын регенерациялау үшін ең оңтайлы қоректік орта болып табылатындығы анықталды Эксперименттер жалғасуда.

Основные технологические и технико-экономические показатели результатов заключаются в оптимизации условий Agrobacterium-опосредованной трансформации люцерны посевной и селекции трансформированных клеток и изучении особенностей регенерации растений из трансформированных клеток люцерны посевной в культуре in vitro.

Нәтижелердің негізгі технологиялық және техникалық-экономикалық көрсеткіштері жоңышқаның Agrobacterium-негізделген трансформациялау және трансформацияланатын жасушаларды таңдау шарттарын оңтайландыру және in vitro культурасында кәдімгі жоңышқа жасушаларынан трансформацияланған өсімдіктердің регенерация ерекшеліктерін зерттеу болып табылады.

не вндрены

енгізілмеген

Генетически модифицированных растений люцерны посевной, способные эффективно аккумулировать и деградировать пестициды будут востребованы в сельскохозяйственном секторе Республики Казахстан.

Пестицидтерді тиімді жинақтауға және деградациялауға қабілетті генетикалық түрлендірілген жоңышқа өсімдіктері Қазақстан Республикасының ауыл шаруашылығы саласында сұранысқа ие болады.

биотехнологическая промышленность

биотехнологиялық өнеркәсіп

UDC indices
574/577
International classifier codes
62.37.29;
Key words in Russian
люцерна посевная; культура клеток; генетически модифицированные растения; экспрессия; фиторемедиация;
Key words in Kazakh
егіндік жоңышқа; жасуша культурасы; генетикалық түрлендірілген өсімдіктер; экспрессия; фиторемедиация;
Head of the organization Раманкулов Ерлан Мирхайдарович Ph.D / Профессор
Head of work Хамзина Салтанат Рашидовна Phd / -