The object of research, development or design (in Russian) : Синтетические ДНК-субстраты, содержащие различные модификации оснований ДНК, и очищенная гомогенная ДНК-гликозилаза человека TDG

The object of research, development or design (in Kazakh) : ДНҚ негіздерінің әртүрлі модификацияларын қамтитын синтетикалық ДНК-субстратар, және гомогенді тазартылған рекомбинантты адамның TDG ДНҚ-гликозилазасы

Aim of work (in Russian) : Охарактеризовать на молекулярном уровне механизмы, вовлеченные в аберрантный путь эксцизионной репарации оснований (BER), инициируемый мисматч-специфической тимин-ДНК гликозилазой в условиях in vitro и in vivo, и оценить физиологическую роль аберрантного BER в накоплении индуцированных повреждениями ДНК и спонтанных мутаций в живых клетках.

Aim of work (in Kazakh) : Молекулярлық деңгейде мисматч- спецификалық тимин-ДНҚ гликозилазамен инициацияланған аберрантты негізді эксцизиялық репарациялау (BER) жолына қатысатын механизмдерді in vitro және in vivo сипаттау және аберрантты BER -дің тірі жасушаларда индукцияланған ДНҚ зақымдануының әсерінен және спонтанды мутациялар жинақталуындағы физиологиялық рөлін бағалау

Методы исследования (на русском) : Синтез и очистка олигонуклеотидов. Химические модификации синтетических олигонуклеотидов. Очистка и характеристика модифицированных продуктов ДНК с помощью гель-электрофореза, ВЭЖХ и MALDI-TOF MS. Бактериальная трансфекция и экспрессия белков; жидкостная хроматография рекомбинантных белков, аффинная хроматография; вестерн-блоттинг.

Методы исследования (на казахском) : Олигонуклеотидтердің синтезі мен тазартылуы. Синтезделген олигонуклеотидтердің химиялық модификациясы. Гель-электрофорез көмегімен модификацияланған ДНҚ өнімдерін тазалау және сипаттау , ВЭЖХ және MALDI-TOF MS. Бактериалдық трансфекция және белкта рэкспрессиясы; рекомбинантты белоктардың сұйықтық хроматографиясы, аффинндік хроматография; вестерн-блоттинг.

Obtained results and novelty (in Russian) : Тотыққан негіздер, аристолактам-адениндік аддукт, ДНҚ экзоциклдік аддукты и ДНҚ-ДНҚ тігінділері секілді ДНҚ негіздерінің күрделі модификациялары бар ДНҚ субстраттар синтезделіп, гель-электрофорез көмегімен ВЭЖХ және MALDI-TOF MS көмегімен сипатталды. Сайт бағытталған мутагенез көмегімен белсенділігі жоғалған TDGN140A және гиперактивті TDGA145G, TDG H151Q белок формаларын кодтайтын мутацияланған гендер алынды. Адамның TDG гликозилаза ферменті және оның белсенділігі жоғалған TDGN140A және гиперактивті TDGA145G, TDG H151Q формалары E. coli жүйесінде экспрессияланып, аффинндік хроматография көмегімен гомогенді күйде тазартылып алынды. Осы жобаны орындау барысында алынған нәтижелер in vitro және in vivo жағдайында күрделі ДНҚ зақымдануының мисматч-спецификалық TDG-гликозилазамен басталған аберрантты эксцизиялық репарация жолының молекулалық механизмін жақсырақ түсінудің алғашқы әрекеті болып табылады. Шетелдік рецензияланған басылымда 1 (бір) мақала жарияланды.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Синтезированы субстраты ДНК, содержащие различные модификации оснований ДНК такие как окисленные основания, аристолактам-адениновые аддукты, экзоциклические аддукты ДНК и сшивки ДНК-ДНК, очищены и охарактеризованы с помощью гель-электрофореза, ВЭЖХ и MALDI-TOF MS. Методом сайт направленного мутагенеза получены гены кодирующие неактивную TDGN140A и гиперактивные TDGA145G, TDG H151Q формы белка. Гликозилаза TDG человека и ее неактивная TDGN140A и гиперактивная TDGA145G, TDG H151Q формы экспрессированы в E. coli и очищены с помощью аффинной хроматографии. Результаты, полученные в данном проекте, являются первой попыткой лучшего понимания молекулярного механизма инициированного мисматч-специфической TDG-гликозилазой пути аберрантной эксцизионной репарации сложных повреждений ДНК in vitro и in vivo. Опубликована 1 (одна) статья в рецензируемом зарубежном издании.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Проект фундаментального характера направленный на изучение аберрантной пути BER, инициируемый монофункциональной ДНК-гликозилазой TDG человека при сложных повреждениях ДНК in vitro и in vivo.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : In vitro және in vivo жағдайында күрделі ДНҚ зақымдануларының адамның монофункционалды TDG ДНҚ гликозилазасымен иницияцияланатын аберрантты BER жолын зерттеуге бағытталған іргелі жоба.

Level of implementation (in Russian) : Результаты работы могут быть внедрены в учебный процесс и использованы в специальных курсах для студентов старших курсов, магистрантов и PhD докторантов таких как, молекулярная биология, канцерогенез и молекулярные механизмы старения и изменчивости.

Level of implementation (in Kazakh) : Жұмыс нәтижелері оқу процесіне енгізілуі мүмкін және молекулалық биология, канцерогез және қартаю мен өзгергіштіктің молекулалық механизімдері сияқты жоғары курс студенттеріне, магистранттар мен PhD докторанттарына арналған арнайы курстарды оқу кезінде пайдаланылуы мүмкін.

Efficiency (in Russian) : Проект фундаментального характера. Задачи, которые решаются в данном проекте, являются первой попыткой лучшего понимания молекулярного механизма инициированного мисматч-специфической TDG-гликозилазой пути аберрантной эксцизионной репарации сложных повреждений ДНК in vitro и in vivo. Выполнение поставленных задач обеспечит уникальный угол зрения на проблемы механизмов и лечения возрастных заболеваний человека.

Efficiency (in Kazakh) : Жоба бойынша зерттеулер іргелі сипаттамаларға ие. Осы жобада шешілетін міндеттер in vitro және in vivo жағдайында күрделі ДНҚ зақымдануының мисматч-спецификалық TDG-гликозилазамен басталған аберрантты эксцизиялық репарация жолының молекулалық механизмін жақсырақ түсінудің алғашқы әрекеті болып табылады. Тапсырмаларды орындау адамның жасқа байланысты ауруларының механизмдері мен емдеу мәселелеріне бірегей бұрыштан қарауға мүмкіндік береді.

Field of application (in Russian) : Биохимия и молекулярная биология

Field of application (in Kazakh) : Биохимия және молекулярлық биология