Inventory number | IRN | Number of state registration | ||
---|---|---|---|---|
0322РК00122 | AP09258581-KC-22 | 0121РК00146 | ||
Document type | Terms of distribution | Availability of implementation | ||
Краткие сведения | Gratis | Number of implementation: 0 Not implemented |
||
Publications | ||||
Native publications: 0 | ||||
International publications: 1 | Publications Web of science: 1 | Publications Scopus: 0 | ||
Patents | Amount of funding | Code of the program | ||
0 | 21957588.54 | AP09258581 | ||
Name of work | ||||
Получение штамма клеток гибридом продуцирующие моноклональные антитела против внеклеточного фрагмента рецептора CTLA-4 | ||||
Type of work | Source of funding | Report authors | ||
Applied | Муканов Касым Касенович | |||
0
0
0
0
|
||||
Customer | МНВО РК | |||
Information on the executing organization | ||||
Short name of the ministry (establishment) | МНВО РК | |||
Full name of the service recipient | ||||
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии" | ||||
Abbreviated name of the service recipient | ТОО "Национальный центр биотехнологии" | |||
Abstract | ||||
Штаммы гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела против рецептора цитотоксического Т-лимфоцита (CTLA-4) человека. Адамның цитотоксикалық Т лимфоцит рецепторына (CTLA-4) қарсы моноклоналды антиденелерді өндіруші гибрид жасушалары болып табылады. Получение штаммов гибридных клеток продуцирующих моноклональные антитела против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора цитотоксического Т-лимфоцита человека. Адамның цитотоксикалық Т-лимфоцитінің CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасушалардың штаммдарын алу болып табылады. Методы генетической инженерии, а также иммунологические, биохимические и биотехнологические методы исследования. Гендік инженерия әдістері, сонымен қатар иммунологиялық, биохимиялық және биотехнологиялық зерттеу әдістері қолданылды. Репрезентативные спектры MS/MS пептида AMHVAQPAVVLASSR рекомбинантного CTLA-4 и их ионов фрагментации соответствовали масс-спектрам белка CTLA4 (Score 5169) представленные в базе данных SwissProt. Определена активность связывания рекомбинантного CTLA-4 с B7-1Fc составляющая ЕС50 150 нг/мл. Отработаны параметры иммунизации мышей, концентрации полиэтиленгликоля (ПЭГ) в гибридизационном растворе, рН раствора ПЭГ, время инкубирования клеток в безсывороточной среде. Было получено 175 клонов в 384 засеянных лунках, что составляет 46% клонообразования. Из полученных клонов 27 (15%) клонов гибридных клеток продуцировали антитела против рекомбинантного CTLA-4 белка. Гибридные клетки, продуцирующие антитела, клонировали трижды. После третьего клонирования из 96 полученных клонов 81 субклон продуцировал антитела к CTLA-4, что составляет 85% положительных клонов. После клонирования клетки гибридомы не изменили своих продуктивных и культуральных свойств в течение 16 пассажей в условиях in vitro (время наблюдения). Впервые в Республике Казахстан получены штаммы гибридных клеток продуценты моноклональных антител против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора человека. Рекомбинантты CTLA-4 пептидінің AMHVAQPAVVLASSR MS/MS-спектрлері және олардың фрагментация иондары SwissProt дерекқорында ұсынылған CTLA4 ақуызының (5169 балл) массалық спектрлеріне сәйкес келді. Рекомбинантты CTLA-4-тің B7-1Fc-пен байланысу белсенділігі анықталды, ол EC50 150 нг/мл болды. Тышқандарды иммунизациялау параметрлері, будандастыру ерітіндісіндегі полиэтиленгликоль (ПЭГ) концентрациясы, ПЭГ ерітіндісінің рН мәні, сарысусыз ортада жасуша инкубациялау уақыты әзірленді. 384 егілген планшет лункаларында 175 клон алынды, бұл 46% клондауды білдіреді. Алынған клондардың 27 (15%) гибридті жасуша клондары рекомбинантты CTLA-4 ақуызына қарсы антиденелерді өндірілген. Антиденелерді өндіретін гибридті жасушалар үш рет клондалған. Үшінші клондаудан кейін алынған 96 клоннан 81 субклон CTLA-4 антиденелерін өндірілген, бұл оң клондардың 85% құрайды. Клондаудан кейін гибридома жасушалары in vitro жағдайында (бақылау уақыты) 16 рет пассаж өту кезінде өнімді және культуральдык қасиеттерін өзгерткен жоқ. Қазақстан Республикасында алғаш рет адамның CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасушалардың штаммдары алынды. Штаммы гибридных клеток продуценты моноклональных антител против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора человека, обладают высокой продуктивностью. Адамның CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасуша штаммдары жоғары өнімді болып табылады . Проект на стадии разработки. Жоба әзірленуде. Определяется высокой продуктивной способностью штаммов гибридных клеток и специфичностью моноклональных антител против внеклеточного фрагмента CTLA-4 рецептора. Гибридті жасуша штаммдарының жоғары өнімділігімен және CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс фрагментіне қарсы моноклоналды антиденелердің ерекшелігімен анықталады. Медицина Медицина |
||||
UDC indices | ||||
57.088.2; 571.27 | ||||
International classifier codes | ||||
34.15.27; 34.43.17; | ||||
Key words in Russian | ||||
Штамм-продуцент; рекомбинантный белок,; гликопротеин цитотоксического Т-лимфоцита,; моноклональные антитела; гибридома; | ||||
Key words in Kazakh | ||||
Штамм-продуцент; рекомбинантный белок,; гликопротеин цитотоксического Т-лимфоцита,; моноклональные антитела; гибридома; | ||||
Head of the organization | Раманкулов Ерлан Мирхайдарович | Ph.D / Профессор | ||
Head of work | Муканов Касым Касенович | Доктор ветеринарных наук / профессор |