Inventory number IRN Number of state registration
0322РК00122 AP09258581-KC-22 0121РК00146
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 1 Publications Web of science: 1 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 21957588.54 AP09258581
Name of work
Получение штамма клеток гибридом продуцирующие моноклональные антитела против внеклеточного фрагмента рецептора CTLA-4
Type of work Source of funding Report authors
Applied Муканов Касым Касенович
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Штаммы гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела против рецептора цитотоксического Т-лимфоцита (CTLA-4) человека.

Адамның цитотоксикалық Т лимфоцит рецепторына (CTLA-4) қарсы моноклоналды антиденелерді өндіруші гибрид жасушалары болып табылады.

Получение штаммов гибридных клеток продуцирующих моноклональные антитела против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора цитотоксического Т-лимфоцита человека.

Адамның цитотоксикалық Т-лимфоцитінің CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасушалардың штаммдарын алу болып табылады.

Методы генетической инженерии, а также иммунологические, биохимические и биотехнологические методы исследования.

Гендік инженерия әдістері, сонымен қатар иммунологиялық, биохимиялық және биотехнологиялық зерттеу әдістері қолданылды.

Репрезентативные спектры MS/MS пептида AMHVAQPAVVLASSR рекомбинантного CTLA-4 и их ионов фрагментации соответствовали масс-спектрам белка CTLA4 (Score 5169) представленные в базе данных SwissProt. Определена активность связывания рекомбинантного CTLA-4 с B7-1Fc составляющая ЕС50 150 нг/мл. Отработаны параметры иммунизации мышей, концентрации полиэтиленгликоля (ПЭГ) в гибридизационном растворе, рН раствора ПЭГ, время инкубирования клеток в безсывороточной среде. Было получено 175 клонов в 384 засеянных лунках, что составляет 46% клонообразования. Из полученных клонов 27 (15%) клонов гибридных клеток продуцировали антитела против рекомбинантного CTLA-4 белка. Гибридные клетки, продуцирующие антитела, клонировали трижды. После третьего клонирования из 96 полученных клонов 81 субклон продуцировал антитела к CTLA-4, что составляет 85% положительных клонов. После клонирования клетки гибридомы не изменили своих продуктивных и культуральных свойств в течение 16 пассажей в условиях in vitro (время наблюдения). Впервые в Республике Казахстан получены штаммы гибридных клеток продуценты моноклональных антител против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора человека.

Рекомбинантты CTLA-4 пептидінің AMHVAQPAVVLASSR MS/MS-спектрлері және олардың фрагментация иондары SwissProt дерекқорында ұсынылған CTLA4 ақуызының (5169 балл) массалық спектрлеріне сәйкес келді. Рекомбинантты CTLA-4-тің B7-1Fc-пен байланысу белсенділігі анықталды, ол EC50 150 нг/мл болды. Тышқандарды иммунизациялау параметрлері, будандастыру ерітіндісіндегі полиэтиленгликоль (ПЭГ) концентрациясы, ПЭГ ерітіндісінің рН мәні, сарысусыз ортада жасуша инкубациялау уақыты әзірленді. 384 егілген планшет лункаларында 175 клон алынды, бұл 46% клондауды білдіреді. Алынған клондардың 27 (15%) гибридті жасуша клондары рекомбинантты CTLA-4 ақуызына қарсы антиденелерді өндірілген. Антиденелерді өндіретін гибридті жасушалар үш рет клондалған. Үшінші клондаудан кейін алынған 96 клоннан 81 субклон CTLA-4 антиденелерін өндірілген, бұл оң клондардың 85% құрайды. Клондаудан кейін гибридома жасушалары in vitro жағдайында (бақылау уақыты) 16 рет пассаж өту кезінде өнімді және культуральдык қасиеттерін өзгерткен жоқ. Қазақстан Республикасында алғаш рет адамның CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасушалардың штаммдары алынды.

Штаммы гибридных клеток продуценты моноклональных антител против внеклеточного домена CTLA-4 рецептора человека, обладают высокой продуктивностью.

Адамның CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс доменіне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасуша штаммдары жоғары өнімді болып табылады .

Проект на стадии разработки.

Жоба әзірленуде.

Определяется высокой продуктивной способностью штаммов гибридных клеток и специфичностью моноклональных антител против внеклеточного фрагмента CTLA-4 рецептора.

Гибридті жасуша штаммдарының жоғары өнімділігімен және CTLA-4 рецепторының жасушадан тыс фрагментіне қарсы моноклоналды антиденелердің ерекшелігімен анықталады.

Медицина

Медицина

UDC indices
57.088.2; 571.27
International classifier codes
34.15.27; 34.43.17;
Key words in Russian
Штамм-продуцент; рекомбинантный белок,; гликопротеин цитотоксического Т-лимфоцита,; моноклональные антитела; гибридома;
Key words in Kazakh
Штамм-продуцент; рекомбинантный белок,; гликопротеин цитотоксического Т-лимфоцита,; моноклональные антитела; гибридома;
Head of the organization Раманкулов Ерлан Мирхайдарович Ph.D / Профессор
Head of work Муканов Касым Касенович Доктор ветеринарных наук / профессор