Inventory number IRN Number of state registration
0321РК00295 AP08855746-KC-21 0120РК00370
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 1 Publications Web of science: 1 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 16018894.33 AP08855746
Name of work
Разработка биотехнологии повышения продуктивности растений посредством активации процесса биогенеза рибосом
Type of work Source of funding Report authors
Applied Жигайлов Андрей Викторович
0
1
1
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения "Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина"
Abbreviated name of the service recipient РГП на ПХВ "Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина"
Abstract

кДНК-ген RPS6K2 из Arabidopsis thaliana, агробактерии (Agrobacterium tumefaciens), табак (Nicotiana tabacum)

Arabidopsis thaliana- дан алынған RPS6K2 кДНҚ- гені, темекі (Nicotiana tabacum), агробактериялар (Agrobacterium tumefaciens)

На примере растений табака разработать биотехнологию получения генетически модифицированных растений с повышенной биомассой и продуктивностью на основе оптимизации экспрессии мутированного кДНК-гена AtRPS6K2(S296E, S437E, T455E), кодирующего конститутивно активированную форму протеинкиназы рибосомного белка S6 из Arabidopsis thaliana (AtRPS6K2).

Темекі өсмдіктерінің мысалында Arabidopsis thaliana- дан алынған S6 рибосомдық ақуыздың констутивті белсендірілген протеинканаза түрін кодтайтын, мутацияланған AtRPS6K2(S296E, S437E, T455E) кДНҚ- генінің экспрессиясын оңтайландыру негізінде биомассасы және өнімділігі көбейген генді түрлендірілген өсімдіктерді алу биотехнологиясын әзірлеу.

В работе применены методы трансформации клеток бактерий и растений, выдеделение нуклеиновых кислот, электрофорез НК и белков, ПЦР, обратная транскрипция, вестерн-блоттинг, спектрофотометрия

Бұл жұмыста бактерия және өсімдік жасышаларын трансформациялау, нуклеин қышқылдарын бөлу, нуклеин қыщқылдары мен ақуыздардың электрофорезі, ПТР, кері транскрипциялау, вестерн- блоттинг, спектрофотометрикалық талдау әдістері қолданылды

Проведена трансформация клеток агробактерий ДНК-конструкцией pCambia-35S-5’TEV-His-AtRPS6K2(S296E, S437E, T455E)-Nos, несущей мутированный вариант кДНК AtRPS6K2 под контролем энхансера транскрипции 5’TEV, 35S-CaMV промотора и nos-терминатора транскрипции. Проведена вакуумная инфильтрация листовых дисков табака и осуществлена транзиентная (временная) экспрессия цис-ена AtRPS6K2 in vivo. Методами ОТ-ПЦР и иммуноблоттинга подтверждена экспрессия цис-гена в трансформированных клетках. Проведена стабильная трансформация табака. Растения-регенеранты размножены методом микроклонального размножения, из них выделены геномные ДНК, методом ПЦР подтверждено наличие трансгенной вставки в геноме нескольких регенерантов.

5’TEV транскрипция күшейткіші, 35S-CaMV промоторы және nos-терминаторы бақылауында, мутацияланған кДНҚ AtRPS6K2 нұсқасы бар pCambia-35S-5’TEV-His-AtRPS6K2(S296E, S437E, T455E)-Nos ДНҚ- құрылымдарыменен агробактерия жасушаларының трансформациясы өткізілді. Темекі жапырақтарының дискілеріне вакуумдық инфильтрация жүргізілді және де in vivo күйінде AtRPS6K2 цис- генінің транзиентті (уақытша) экспрессиясы жүзеге асырылды. КТ- ПТР және иммуноблоттинг әдістері арқылы трансформацияланған жасушаларда AtRPS6K2 цис- генінің экспрессиясы расталды. Темекі өсімдіктерінің тұрақты трансформациясы жүргізілді. Темекінің тұрақты трансформациясы жүргізілді. Регенерацияланған өсімдіктер микроклоналды көбейту арқылы көбейтілді, олардан геномды ДНҚ препараттары оқшауланып, бірнеше регенеранттардың геномында трансгенді кірістірудің бар болуы ПТР көмегімен расталды.

Линия агробактерий, несущих бинарный вектор с мутированным вариантом кДНК-гена AtRPS6K2. Лабораторный регламент.

қолданылатын құрамында мутацияланған кДНҚ AtRPS6K2 нұсқасымен бинарды векторы бар агробактерияның линиясы. Зертханалық ережелер

Результаты апробированы в трех институтах, включая ИМББ. Подана заявка на регистрацию акта внедрения.

Нәтижелер үш институтта, соның ішінде МББИ-де сынақтан өтті. Орындау актісін тіркеуге өтініш берілді.

Получение линии агробактерий, несущих бинарный вектор с мутированным вариантом кДНК-гена AtRPS6K2, используемой для трансформации растений методом агроинфекции с целью повышения их продуктивности.

өсімдіктердің өнімділігін арттыру мақсатында оларды агроинфекция әдісімен трансформациялау үшін қолданылатын құрамында мутацияланған кДНҚ AtRPS6K2 нұсқасымен бинарды векторы бар агробактериялар линиясын алу.

Молекулярная биология, генетическая инженерия растений

Молекулалық биология, өсімдіктер генетикалық инженериясы.

UDC indices
577.216.3; 577.217; 577.218
International classifier codes
34.15.00; 34.15.27; 34.15.49;
Key words in Russian
Киназа рибосомного белка S6 растений; Фосфомиметическая мутация; Временная экспрессия; Цис-ген; Трансформация;
Key words in Kazakh
Өсімдік S6 рибосомалық белоктын киназасы; Фосфомиметикалық мутациясы; Уақытша экспрессиясы; Цис-генi; Трансформациясы;
Head of the organization Шарипов Камалидин Орынбаевич Доктор биологических наук / Профессор
Head of work Жигайлов Андрей Викторович Кандидат биологических наук / Ассоц. профессор