Inventory number IRN Number of state registration
0324РК01597 AP23489672-KC-24 0124РК00995
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 33846465 AP23489672
Name of work
Новый биологический препарат на основе фагов для борьбы с Treponema pallidum
Type of work Source of funding Report authors
Applied Сырым Назым Сырымкызы
0
1
1
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МЗ РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "НИИПББ"
Abstract

Возбудитель сифилиса Treponema pallidum

Мерездің қоздырғышы Treponema pallidum

Получение препарата бактериофага против Treponema pallidum и определение его эффективности.

Treponema pallidum-ға қарсы бактериофаг препаратын алу және оның тиімділігін анықтау

Для выделения бактериофагов против возбудителя Treponema pallidum были использованы биологические материалы от больных сифилитической инфекцией людей. Культивирование Treponema pallidum in vivo были проводены на кроликах-самцах. Для этого животным интратестикулярно вводился кровь или экссудат из шанкра от больных сифилитической инфекцией людей из расчета 1,5 мл в одно яичко. Затем кролики отобраны с 7 - 10 – дневным специфическим орхитом. Из каждого семенника были извлечены трепонемы, затем они были измельчены инфицированная ткань ножницами в кашицеобразную массу. Измельченная ткань была залита стерильным 0,9% раствором натрия хлорида и перемешена путем встряхивания на орбитальном шейкере. После встряхивания полученная взвесь были слиты в стерильные центрифужные пробирки и центрифугированы. Далее образцы Treponema pallidum были культивированы in vitro на культуре клеток и инкубированы в трехгазовом термостате с подсоединением к резервуару CO2, О2 и резервуару с N2. Выделение ДНК проводили с использованием набора реагентов GeneProof™∣Treponema pallidum100, Applied Biosystems™ TaqPath™ согласно инструкции производителя. Для постановки РТ ПЦР использовали коммерческий набор реагентов Applied Biosystems™ TaqPath™ GeneProof™ согласно инструкции производителя. Секвенирование ДНК и амплификацию генов arp, tprII и tp0548, используемых в системе молекулярного типирования T. pallidum, а также гена 23S rRNA, осуществляли на автоматическом секвенаторе MiSeq.

Treponema pallidum қоздырғышына қарсы бактериофагтарды оқшаулау үшін мерез инфекциясы бар адамдардан алынған биологиялық материалдар пайдаланылды. Treponema pallidum-ды in vivo өсіру еркек қояндарда жүргізілді. Осы мақсатта жануарларға бір аталық безге 1,5 мл мөлшерінде мерез инфекциясы бар адамдардан алынған қан немесе шанкр экссудаты енгізілді. Содан кейін 7-10 күндік спецификалық орхитпен ауыратын қояндардың аталық бездерінен трепонемалар алынып, тіндер қайшы арқылы ұнтақталды. Ұнтақталған тіндер стерильді 0,9% натрий хлоридінің ерітіндісімен толтырылды және орбитальды шайқағышта шайқау арқылы араластырылды. Шайқағаннан кейін алынған суспензия стерильді центрифугалық түтіктерге құйылып, центрифугаланды. Содан кейін Treponema pallidum үлгілері жасуша культурасында in vitro өсірілу үшін CO2, O2 және N2 резервуарына қосылған үш газды термостатта инкубацияланды. ДНҚ-ны оқшаулау өндірушінің нұсқауларына сәйкес GeneProof™∣Treponema pallidum100, Applied Biosystems™ TaqPath™ реагенттер жиынтығының көмегімен жүргізілді. РТ ПТР қою үшін өндірушінің нұсқауларына сәйкес Applied Biosystems™ TaqPath™ GeneProof™ реагенттерінің коммерциялық жиынтығы пайдаланылды. Treponema pallidum молекулалық типтеу жүйесінде қолданылатын arp, tprII және tp0548 гендерін, сондай-ақ 23S rRNA генін ДНҚ секвенирлеу және күшейту MiSeq автоматты секвенаторында жүргізілді.

У пациентов, получающих лечение в кожно-венерологическом диспансере, из 2-х шанкровых экссудатов было выделено 2 пробы, из цельной крови – 1 проба Treponema pallidum. В образцах методом ПЦР в реальном времени было подтверждено присутствие ДНК Treponema pallidum. Молекулярное типирование изолятов по генам arp, tprII и tp0548 позволило идентифицировать полный молекулярный субтип каждого изолята. Были выявлены по одному варианту генов arp и tprII, а также 3 варианта гена tp0548. Таким образом, в проанализированных изолятах определены три молекулярных субтипа: 14d/f, 14d/d и 14d/g. Был оформлен промежуточный отчет за 2024 год. Научной новизной является то, что впервые в республике будет разработан биологический препарат на основе фагов для борьбы с больных сифилитической инфекцией людей.

Тері - венерологиялық диспансерде емделіп жатқан пациенттерде шанкр экссудатынан - 2 және қан сынамасынан – 1 Treponema pallidum оқшауланды. Үлгілерде T. pallidum ДНҚ-сының болуы нақты уақыттағы ПТР арқылы расталды. Аrp, tprII және tp0548 гендерін пайдаланып изоляттарды молекулалық типтеу әрбір изоляттың толық молекулалық қосалқы түрін анықтауға мүмкіндік берді. Аrp және tprII гендерінің бір нұсқасы, сонымен қатар tp0548 генінің 3 нұсқасы анықталды. Осылайша, талданған изоляттарда үш молекулалық типі анықталды: 14d/f, 14d/d және 14d/g. 2024 жылға аралых есеп жазылды. Ғылыми жаңалығы – республикаызда алғаш рет мерез індетімен ауыратын адамдармен күресу үшін фагтар негізіндегі жаңа емдік биологиялық препарат жасалатын болады.

Будет создана формуляция биопрепарата на основе бактериофага против Treponema pallidum для лечения больных людей от сифилитической инфекции, который будет способсвовать быстрому выздоровлению больных сифилитической инфекцией людей, и позволит значительно сократить количество случаев болезни. Экономические показатели заключаются – в применении биопрепарата на основе бактериофага против Treponema pallidum больных сифилисом людей, который будет способствовать снижению экономического ущерба от данного заболевания вместо дорогстоящих антибиотиков что в конечном итоге приведет к достижению эпидемиологического благополучия Республики Казахстан по сифилитической инфекции.

Ауру адамдарды мерез инфекциясынан емдеу үшін Treponema pallidum-ға қарсы бактериофаг негізіндегі биологиялық препараттың формуляциясы жасалады, бұл мерездік инфекциядан зардап шегетін адамдардың тез сауығып кетуіне ықпал етеді және ауру жағдайларының санын айтарлықтай азайтады. Экономикалық көрсеткіштер мерезбен ауыратын адамдарда Treponema-ға қарсы бактериофаг негізіндегі биологиялық өнімді пайдаланудан тұрады, бұл қымбат антибиотиктердің орнына осы аурудан болатын экономикалық зиянды азайтуға көмектеседі, бұл сайып келгенде Қазақстан Республикасы мерездік инфекцияға қатысты халықтың эпидемиологиялық салауаттылығына қол жеткізуге әкеледі.

Медицина

Медицина

UDC indices
61:616:616.9:616.97:616.972
International classifier codes
34.27.29; 76.03.43; 68.41.35; 62.09.39; 34.27.51;
Key words in Russian
устойчивость; возбудитель; сифилис; бактериофаг; фаготерапия;
Key words in Kazakh
төзімділік; қоздырғыш; сифилис; бактериофаг; фаготерапия;
Head of the organization Керимбаев Аслан Амангельдиевич / нет
Head of work Сырым Назым Сырымкызы Кандидат ветеринарных наук / профессор