Inventory number IRN Number of state registration
0224РК00066 BR18574149-OT-24 0123РК00025
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 3
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Number of books Appendicies Sources
1 5 42
Total number of pages Patents Illustrations
82 1 8
Amount of funding Code of the program Table
20000000 О.1070 18
Code of the program's task under which the job is done
05
Name of work
Получение высокоурожайных линий томата, устойчивых к биотическому и абиотическому стрессу путем геномного редактирования перспективных сортов
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied research Методическая документация
Report authors
Пожарский Александр , Костюкова Валерия Сергеевна , Капытина Анастасия Иосифовна , Адильбаева Камила Сериковна , Дулат Бақыт ,
0
1
1
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Республиканское Государственное предприятие на праве хозяйственного ведения "Институт Биологии и биотехнологии растений"
Abbreviated name of the service recipient РГП на ПХВ «ИББР»
Abstract

томат Solanum lycopersicum, табак Nicotiana benthamiana.

қызанақ Solanum lycopersicum, темекі Nicotiana benthamiana.

разработать универсальную генетическую систему для геномного редактирования двудольных растений методом CRISPR-Cas9; провести молекулярно-генетическое изучение генофонда томата страны и отобрать перспективные сорта с потенциалом устойчивости к опасным фитопатогенам, засухе и засолению для направленного редактирования генома.

CRISPR-Cas9 әдісімен қосжарнақты өсімдіктердің геномдық редакциясының әмбебап генетикалық жүйесін жасау; елдің қызанақ генофондына молекулярлық-генетикалық зерттеу жүргізу және геномды мақсатты редакциялау үшін қауіпті өсімдік қоздырғыштарына, құрғақшылыққа және тұздылыққа потенциалды төзімділігі бар перспективалы сорттарды таңдау.

компьютерный дизайн нРНК; Golden-Gate клонирование; электропорация; агробактериальная трансформация; вестерн-блоттинг; colony-PCR; ПЦР-генотипирование; кластерный анализ.

gРНҚ-ны компьютерлік жобалау; Golden Gate клондау; электропорация; агробактериялық трансформация; вестерн-блоттинг әдісі; colony-PCR; ПТР- генотиптеу; кластерлік талдау.

разработаны нРНК для направленного редактирования генов семейства SlMLO у томата для получения растений, устойчивых к мучнистой росе; проведены сборка и клонировавние векторных конструкций для CRISPR/cas9 геномного редактирования, содержащих гены разработанных нРНК и белка Cas9; проведена агробактериальная трансформация и тест экспрессии белка Cas9 в модельных растениях табака; проведен молекулярно-генетический анализ селекционной коллекции из 68 сортов томата, в том числе 13 сортов казахстанской селекции, с использованием микросателлитных (SSR) маркеров для изучения генетической структуры, а также SCAR и CAPS маркеров для идентификации генотипов устойчивых к пяти болезням; на основании данных генотипирования определены и выбраны сорта-кандидаты для направленного редактирования генома. Получены линии томата на основе сортов Лидер и Меруерт с отредактированными генами SlMlo1, SlMlo5, SlMlo8; проведено подтверждение результатов редактирования генов методов ПЦР и секвенирования, а также агрономическая оценка полученных линий.

ақұнтақ кеселіне төзімді өсімдіктерді алу мақсатында SlMLO қызанақ тұқымдасының гендерін мақсатты редакциялау үшін gRNA әзірленді; әзірленген gRNA және Cas9 ақуызының гендерін қамтитын CRISPR/cas9 геномын редакциялау үшін векторлық құрылымдарды құрастыру және клондау жүргізілді; модельдік темекі өсімдіктерінде агробактериялардың трансформациясы және Cas9 протеинінің экспрессия сынағы жүргізілді; генетикалық құрылымды зерттеу үшін микросателлиттік (SSR) маркерлерді, сондай-ақ бес ауруға төзімді генотиптерді анықтау үшін SCAR және CAPS маркерлерін пайдалана отырып, 68 қызанақ сортынан тұратын селекциялық коллекцияға молекулалық-генетикалық талдау жүргізілді, оның ішінде қазақстандық селекцияның 13 сорты; генотиптеу деректерінің негізінде мақсатты геномды редакциялауға үміткер сорттар анықталды және таңдалды. SlMlo1, SlMlo5, SlMlo8 редакцияланған гендері бар Лидер және Меруерт сорттары негізінде қызанақ линиялары алынды; ПТР және секвенирлеу әдістерін қолдану арқылы гендік редакциялау нәтижелері, сондай-ақ алынған сызықтардың агрономиялық бағасы расталды.

выведение новых качественных сортов культурных растений позволит повысить урожайность и обеспечить внутреннею потребность в продуктах АПК. Новые сорта позволят предотвратить зависимость от внешнего рынка в семенном материале. Выведение устойчивых сортов к биотическим факторам позволят снизить интенсивность и количество обработок пестицидами и тем самым снизить загрязнение окружающей среды и за короткое время перейти к органической продукции.

мәдени өсімдіктердің жаңа сапалы сорттарын жасау өнімділікті арттырады және ауыл шаруашылығы өнімдеріне ішкі қажеттілікті қамтамасыз етеді. Жаңа сорттар тұқым материалы бойынша сыртқы нарыққа тәуелділіктің алдын алады. Биотикалық факторларға төзімді асыл тұқымды сорттар пестицидтермен өңдеудің қарқындылығы мен санын азайтады және осылайша қоршаған ортаның ластануын азайтады және қысқа мерзімде органикалық өнімдерге ауысады.

разработаны методические рекомендацию по использованию системы CRISPR/Cas9 для редактирования генома томата; получены растения томата для последующей работы по получению чистых мутантных линий свободных от трансгенных конструкций.

қызанақ геномын редакциялау үшін CRISPR/Cas9 жүйесін қолдану бойынша әдістемелік ұсыныстар әзірленді; қызанақ өсімдіктері трансгендік құрылымдардан таза мутант линияларын алу бойынша кейінгі жұмыстар үшін алынды.

в результате работы получены кандидатные мутантные растения томата с мутациями в генах SlMlo1, SlMlo5, SlMlo8, обеспечивающими устойчивость к мучнистой. Данные растения будут использованы в дальнейшем для получения исходного материала для селекции линий томата, устойчивых к мучнистой росе.

жұмыс нәтижесінде ұнтақты көгеруге төзімділікті қамтамасыз ететін SlMlo1, SlMlo5, SlMlo8 гендерінің мутациялары бар кандидат мутантты қызанақ өсімдіктері алынды. Бұл өсімдіктер болашақта ұнтақты көгеруге төзімді қызанақ линияларын өсіру үшін бастапқы материал алу үшін пайдаланылады.

растениеводство, селекция растений, молекулярная биология, генетическая инженерия.

өсімдік шаруашылығы, өсімдік селекциясы, молекулалық биология, гендік инженерия.

UDC indices
575.224, 635-2, 632.9
International classifier codes
34.15.27; 34.23.57; 68.35.51; 68.35.03; 68.37.31;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
направленное редактирование генома; CRISPR-Cas9; томат; фитопатогены; устойчивость;
Key words in Kazakh
бағытталған геномды редакциялау; CRISPR-Cas9; қызанақ; патогендер; төзімділік;
Head of the organization Жамбакин Кабыл Жапарович Доктор биологических наук / Академик Национальной Академии Наук Республики Казахстан
Head of work Пожарский Александр / нет
Native executive in charge