Inventory number IRN Number of state registration
0323РК00969 AP19677719-KC-23 0123РК00237
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 27346761 AP19677719
Name of work
Разработка отечественного пробиотического препарата на основе ассоциированных штаммов молочнокислых бактерий для повышения иммунной системы у молодняка сельскохозяйственных животных
Type of work Source of funding Report authors
Applied Мыктыбаева Рая Жаксыгуловна
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МСХ РК
Full name of the service recipient
Некоммерческое акционерное общество "Казахский национальный аграрный исследовательский университет"
Abbreviated name of the service recipient НАО "КазНАИУ"
Abstract

Традиционные казахстанские кисломолочные продукты шубат и кумыс, а также 17 штаммов молочнокислых бактерий: 1К-7L, 7K-2L, 3K-24L, 4K-28L, 7K-6L1, 7SH-41L, 8К-52L, 5K-9L1, 10 SH-74L, 12K-78L, 13SH-83L, 14SH-87L, 15K-91L, 7K-16L1, 17K-121L, 19SH-128K, 17K-6L12 отобранные из 158 изолятов.

Қазақтың дәстүрлі сүт қышқылды өнімдері қымыз, шұбат және сүтқышқылды бактерияларың 158 изолятынан 1К-7L, 7K-2L, 3K-24L, 4K-28L, 7K-6L1, 7SH-41L, 8К-52L, 5K-9L1, 10 SH-74L, 12K-78L, 13SH-83L, 14SH-87L, 15K-91L, 7K-16L1, 17K-121L, 19SH-128K, 17K-6L12 іріктеп алынған штамдары.

Разработать отечественный пробиотический препарат на основе ассоциированного штамма молочнокислых бактерий для повышения иммунной системы у молодняка сельскохозяйственных животных.

Ауылшаруашылық төлдерінің иммундық жүйесін жоғарылатуға арналған сүтқышқылды бактериялардың ассоциацияланған штаммдарының негізінде отандық пробиотикалық препарат жасау

Материалом исследования служили кумыс, шубат и новые штаммы молочнокислых бактерий отобранные 17 из 158 изолятов. Выделение, идентификацию и изучение морфологических, культуральных и физиолого-биохимических свойств молочнокислых бактерий проводили по стандартным методикам. Антагонистическую активность определяли диффузионным методом. Чувствительность МКБ к антибиотикам методом бумажных дисков. Определение адгезивных свойств молочнокислых бактерий, субкультивировали трижды, центрифугировали при 5000×g в течение 10 мин. Удалив супернатант, гранулу трижды промывали стерильным PBS. Затем гранулу повторно суспендировали в том же растворе и измеряли при длине волны 600 нм, регистрируя значение 0,4-0,6 для определения оптической плотности до (ODb). Бактериальные суспензии объемом 3,6 мл набирали пипеткой в стеклянные пробирки. Затем 0,6 мл в каждую пробирку добавляли ксилол (Merck). Пробирки закупоривали и перемешивали в течение 1 мин с помощью вихревой машины, а затем выдерживали в течение 1-3 мин. После разделения фаз растворителя и воды жидкую фазу переносили в чистую пробирку с помощью пастеровской пипетки. Секвенирование фрагмента гена 16 sRNA проведено на Applied Biosystems 3500 Genetic Analyzer методом Сэнгера.

Зерттеу материалдары қымыз, шұбат және 158 изоляттан іріктеп алынған сүтқышқылды бактериялардың 17 штамы болды. Сүтқышқылды бактериялардың морфологиялық, культуралдық, физиологиялық биохимиялық қасиеттерін зерттеп, бөліп алу, идентификациялау стандартты әдістер бойынша жүргізілді. Антагонистік қасиетін анықтау диффузия әдістермен жүргізілді. Қағаз дискі әдісін қолдану арқылы сүт қышқылды бактериялардың антибиотикке сезімталдығы анықталды. Адгезиялық қасиетін анықтауда 3 рет белсендірілген өсінділер 5000 rpm’де 10 минут центрифугаланды. Супернатанттарын алып тастап, тұнба 3 рет стерильді PBS пен жуылды. Тұнба дәл сол ерітінді ішінде 600 Нм де 0.4-0.6 аралығында болатындай етіліп ериді. Алынған нәтижелер Odb ретінде қабылданады. Бактериялық суспензияларды 3.6 мл-ден шыны түтікшелерге құйдық. Соноан соң 0.6 мл ксилол (Merck, Germany) әрбір түтікке қосылады. Пробиркалардың қақпағы жабылып пробиркаға арналған араластырғышта 1 минут ішінде тез араластырылады. Еріткіш пен су фазасы екіге бөлінгенге дейін күтіледі. Екі фазаға айрылғаннан кейін су фазасын пастер пипеткасымен таза пробиркаға алынды. Штамдардың молекулалық биологиялық сипаттамасы өндірушінің ұсыныстарына сәйкес DigDye Terminator v 3.1 жинағын пайдаланып Sanger әдісін қолдану арқылы.

Новизна данной работы заключается в том, что впервые были выявлены пробиотические штаммы молочнокислых бактерий: 7K-2L, 7K-6L1, 5K-9L1, 7K-16L1, 17K-6L12. Их уникальность заключается в антагонистической активности против условно-патогенных и патогенных бактерий. Также по результатам исследований установлено, что большинство исследуемых штаммов 4K-28L, 7K-2L, 7K-6L1, 7SH-41L, 8К-52L, 5K-9L1, 12K-78L, 15K-91L, 17K-6L12 обладали высокой адгезивной активностью на уровне 64%. Таким образом вышеуказанные штаммы молочнокислых бактерий были включены в базу данных генетических последовательностей (GenBank) Национального института здравоохранения (США).

Жұмыстың жаңалығы сүт қышқылды бактерияларының пробиотикалық 7K-2l, 7K-6L1, 5K-9L1, 7K-16L1, 17K-6L12 штамдары алғаш рет анықталды. Олардың артықшылығы шартты зардапты және зардапты бактерияларға антагонистік белсенділігі жоғары.Сонымен қатар зерттеу нәтижелері бойынша 4K-28L, 7K-2L, 7K-6L1, 7SH-41L, 8К-52L, 5K-9L1, 12K-78L, 15K-91L, 17K-6L12 штаммдарының көпшілігі 64% деңгейінде жоғары адгезиялық белсенділігі анықталды. Жоғарыда аталған сүт қышқылды бактерияларының штамдары ұлттық денсаулық сақтау институтының (АҚШ) генетикалық реттілік дерекқорына (GenBank) енгізілді.

На основании анализа полученных результатов НИР можно констатировать что выявленные штаммы молочнокислых бактерий 7K-2L, 7K-6L1, 5K-9L1, 7K-16L1, 17K-6L12 на основе полученных молочно-кислых продуктов, обладают высокой антогинической активностью к условно-патогенным и патогенным бактериям. Технико-экономические показатели проекта свидетельствуют о высоком потенциале данной разработки. В результате на основе выявленных новых штаммов молочнокислых бактерий будут созданы пробиотические препараты нового поколения высоким лечебно-профилактическим свойствами.

Алынған ҒЗЖ нәтижелерін талдау барысында, алынған сүт қышқылды өнімдерінің негізінде сүт қышқылы бактерияларының анықталған 7K-2l, 7K-6L1, 5K-9L1, 7K-16l1, 17K-6L12 штамдары шартты зардапты және зардапты бактерияларға жоғары антагонисттік белсенділік көрсетті. Жобаның техникалық-экономикалық көрсеткіштері осы әзірлеменің жоғары мүмкіндіктерін көрсетеді. Нәтижесінде сүт қышқылды бактерияларының анықталған жаңа штаммдарының негізінде жоғары емдік-профилактикалық қасиеттері бар заманауи пробиотикалық препараттары жасалатын болады.

Животноводство, ветеринария, биотехнология

Мал шаруашылығы, ветеринария, биотехнология

UDC indices
636.09:579.6:636.2
International classifier codes
68.41.00; 62.09.39; 68.41.63; 34.27.51;
Key words in Russian
пробиотический препарат; секвенирование; дезоксирибонуклеиновая кислота; республиканская коллекция микроорганизмов; телята; профилактика; лечение; иммунитет;
Key words in Kazakh
пробиотикалық препарат; секвенирование; дезоксирибонуклеин қышқылы; республикалық микроорганизмдер коллекциясы; бұзаулар; профилактика; емдеу; иммунитет;
Head of the organization Куришбаев Ахылбек Кажигулович Доктор сельскохозяйственных наук / Профессор, Академик НАН РК
Head of work Мыктыбаева Рая Жаксыгуловна Кандидат ветеринарных наук / доцент