The object of research, development or design (in Russian) : Трипаносомы, иммуноферментная тест-система, рекомбинантные технологии

The object of research, development or design (in Kazakh) : Трипаносомалар, иммуноферменттік тест жүйесі, рекомбинантты технологиялар

Aim of work (in Russian) : Целью проекта является разработка ИФА тест-системы для диагностики трипаносомоза лошадей с использованием рекомбинантного трипаносомного антигена

Aim of work (in Kazakh) : Жобаның мақсаты рекомбинантты трипаносомалық антигенді қолдана отырып, жылқы трипаносомозын диагностикалауға арналған ИФА тест жүйесін әзірлеу болып табылады

Методы исследования (на русском) : Методы исследований: микробиологические, биохимические, серологические, молекулярно-генетические, физико-химические.

Методы исследования (на казахском) : Зерттеу әдістері: микробиологиялық, биохимиялық, серологиялық, молекулалық-генетикалық, физика-химиялық.

Obtained results and novelty (in Russian) : -Выделение рекомбинантного антигена трипаносомы T. evansi. Оптимизация очистки рекомбинантного антигена. В данном этапе будут получены рекомбинантные белки для проведения сравнительных исследований. -Определение параметров постановки ИФА для серологической диагностики трипаносомоза с использованием рекомбинантного антигена. -Накопление паразитарной массы местной Тrypanosoma evansi и получение трипаносомного антигена. -Приготовление лизатов Тrypanosoma evansi. Определение серопозитивных протеинов с помощью 2Д гель-электрофореза и иммуноблоттинга (Western Blotting) с сыворотками крови лошадей с острой стадией трипаносомоза. -Проведение масс-спектрометрического анализа протеинов, серопозитивных по результатам иммуноблоттинга. Сравнительный анализ результатов масс-спектрометрического анализа с полногеномными данными. Будут определены гены, кодирующие протеины с высокой иммунологической активностью, перспективные для использования в иммунологических тестах.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : - T. evansi трипаносомасының рекомбинантты антигенінің бөлінуі. Рекомбинантты антигенді тазартуды оңтайландыру. Бұл кезеңде салыстырмалы зерттеулер жүргізу үшін рекомбинантты ақуыздар алынады. - Рекомбинантты антигенді қолдана отырып, ТРИПАНОСОМОЗДЫ серологиялық диагностикалау үшін ИФА қою параметрлерін анықтау. --Жергілікті trypanosoma evansi паразиттік массасының жинақталуы және трипаносомалық антигенді алу -- Трипаносома эванси лизаттарын дайындау. Трипаносомоздың өткір сатысы бар жылқылардың қан сарысуларымен 2Д гельдік электрофорез және иммуноблоттинг (Батыс Блоттинг) арқылы серопозитивті ақуыздарды анықтау. - Иммуноблоттинг нәтижелері бойынша серопозитивті ақуыздарға масс-спектрометриялық талдау жүргізу. Толық геномдық деректермен масс-спектрометриялық талдау нәтижелерін салыстырмалы талдау. Иммунологиялық сынақтарда қолдануға перспективалы жоғары иммунологиялық белсенділігі бар ақуыздарды кодтайтын гендер анықталады.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : В разрабатываемой тест-системе будут использоваться рекомбинантные антигены, описанные в литературе как иммунологические маркеры, а также антигены, идентифицированные в настоящем исследовании. Идентификация иммунологически активных антигенных детерминант будет проводиться с помощью иммуноблоттинга T. evansi с образцами сыворотки крови животных в острой фазе инфекции, с последующим масс-спектрометрическим определением прореагировавших белков. Гены, кодирующие эти белки, амплифицируют и клонируют в экспрессионные конструкции для создания рекомбинантных мутантов в E. coli. Это исследование позволит определить белки с высокой антигенностью, которые можно будет использовать для последующей диагностики заболевания.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Әзірленіп жатқан сынақ жүйесінде әдебиетте иммунологиялық маркерлер ретінде сипатталған рекомбинантты антигендер, сондай-ақ осы зерттеуде анықталған антигендер пайдаланылады. Иммунологиялық белсенді антигендік детерминанттарды анықтау инфекцияның өткір кезеңінде жануарлардың қан сарысуының үлгілері бар T. evansi иммуноблоттингімен, содан кейін реакцияға түскен ақуыздарды масс-спектрометриялық анықтаумен жүзеге асырылады. Бұл ақуыздарды кодтайтын гендер E. coli-де рекомбинантты мутанттар жасау үшін экспрессиялық құрылымдарға күшейтіледі және клондалады. Бұл зерттеу ауруды кейінірек диагностикалау үшін қолдануға болатын жоғары антигендік ақуыздарды анықтайды.

Level of implementation (in Russian) : Начата разработка Нормативно-технической документации (НТД): (1) Стандарт организации; (2) Инструкция по изготовлению и контролю; (3) Наставление по применению тест-системы.

Level of implementation (in Kazakh) : Нормативтік-техникалық құжаттаманы (НТҚ) әзірлеу басталды: (1) ұйым стандарты; (2) дайындау және бақылау жөніндегі Нұсқаулық; (3) тест-жүйені қолдану жөніндегі Нұсқаулық.

Efficiency (in Russian) : Обеспечение животноводческих хозяйств и ветеринарных служб РК и стран Центральной Азии высококачественной, чувствительной и специфичной тест-системой, соответствующей международному стандарту GMP, и внедрения современных технологий качества и безопасности в отечественное производство.

Efficiency (in Kazakh) : ҚР және Орталық Азия елдерінің мал шаруашылығы шаруашылықтары мен ветеринариялық қызмет GMP халықаралық стандартына сәйкес келетін жоғары сапалы, сезімтал және ерекше тест-жүйемен қамтамасыз ету және отандық өндіріске сапа мен қауіпсіздіктің заманауи технологияларын енгізу.

Field of application (in Russian) : Ветеринарная паразитология, ветеринарная диагностика, биотехнология

Field of application (in Kazakh) : Ветеринариялық паразитология, ветеринариялық диагностика, биотехнология