Inventory number IRN Number of state registration
0323РК01401 AP19678641-KC-23 0123РК00262
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 27750000 AP19678641
Name of work
Оценка полиморфизма гена BoLA-DRB3, ассоциированного с устойчивостью к лейкозу, для разработки научно-обоснованных подходов к маркер-ориентированной селекции крупного рогатого скота
Type of work Source of funding Report authors
Applied Канатбаев Серик Ганиевич
0
0
1
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Частное высшее профессиональное образовательное учреждение «Западно-казахстанский инновационно-технологический университет»
Abbreviated name of the service recipient ЗКИТУ
Abstract

Биологический материал крупного рогатого скота (кровь) разной породной принадлежности (не менее 300 проб), разводимого в хозяйствах Республики Казахстан.

Қазақстан Республикасының шаруашылықтарында өсірілетін әр түрлі тұқымдық (300 сынамадан кем емес) ірі қара малдың (қанның) биологиялық материалы.

Определить взаимосвязь полиморфизма гена BoLA-DRB3 с уровнем провирусной нагрузки и с течением лейкозного процесса и разработать рекомендации по маркерной геномной селекции, направленной на устойчивость к вирусу лейкоза крупного рогатого скота.

BoLA-DRB3 генінің полиморфизмінің провирустық жүктеме деңгейімен және лейкоз үрдісінің ағымымен байланысын анықтау және ірі қара малдың лейкоз вирусына төзімділікке бағытталған маркерлік геномдық селекция бойынша ұсыныстар жасау.

Серологические исследования проведены посредством реакции иммунодиффузии (РИД) с применением коммерческого набора для диагностики лейкоза крупного рогатого скота производства Курской биофабрики и методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием диагностического набора в блокирующем варианте Enzootic Bovine Leukosis Virus gp51 Antibody test kit/IDEXX Leukosis Blocking PO2140-07, предназначенного для исследования проб сыворотки крови и плазмы крупного рогатого скота. Гематологические исследования проводились путем подсчитывания количества лейкоцитов в 1 мл крови и качественной оценки лимфоидных элементов – лимфоцитов. При помощи автоматического гематологического анализатора ВС-2800Vet (Китай, 2010). Для проведения генетических исследований в качестве биологического материала использовалась кровь крупного рогатого скота. ДНК из крови выделена с применением коммерческих наборов, предназначенных для выделения геномная ДНК. Оценка качества ДНК проводилась методом гель-электрофореза, количественная оценка ДНК проводилась путем измерения ее концентрации на спектрофотометре. Оптимизацию методики постановки ПЦР для проведения ДНК-типирования животных по гену BoLA-DRB3 к BLV проводили экспериментальным методом с изменением концентрации компонентов реакционной смеси и температурно-временного режима.

Серологиялық зерттеулер Курск биофабрикасы өндірген ірі қара малдың лейкозын диагностикалауға арналған коммерциялық жинақты қолдана отырып, иммунодиффузия реакциясы (ИДР) көмегімен және қан сарысуы мен ірі қара мал плазмасының сынамаларын зерттеуге арналған Enzootic Bovine Leukosis Virus gp51 Antibody test kit/IDEXX Leukosis Blocking PO2140-07 блоктау нұсқасында диагностикалық жинақты пайдалана отырып, иммуноферменттік талдау (ИФТ) әдісімен жүргізілді. Гематологиялық зерттеулер 1 мл қандағы лейкоциттер санын санау және лимфоидты элементтер – лимфоциттерді сапалы бағалау арқылы жүргізілді. ВС-2800vet автоматты гематологиялық анализаторының көмегімен (Қытай, 2010). Генетикалық зерттеулер жүргізу үшін биологиялық материал ретінде ірі қара малдың қаны пайдаланылды. Қандағы ДНҚ геномдық ДНҚ-ны бөлуге арналған коммерциялық наборды қолдана отырып бөлінді. ДНҚ сапасын бағалау гельдік электрофорез әдісімен жүргізілді, ДНҚ-ны сандық бағалау оның спектрофотометрдегі концентрациясын өлшеу арқылы жүргізілді. BoLA-DRB3 к BLV гені бойынша жануарларды ДНҚ-типтендіруді жүргізу үшін ПТР қою әдістемесін оңтайландыруды реакция қоспасы компоненттерінің концентрациясы мен температура-уақыт режимінің өзгеруімен эксперименттік әдіспен жүргіздік.

Дана оценка уровню распространения лейкоза крупного рогатого скота и особенностей лейкозного процесса на территории Республики Казахстан; сформированы экспериментальные группы животных; проведена диагностика лейкоза серологическими, гематологическим и молекулярно-генетическим методами исследований; ранжированы экспериментальные животные по клинической стадии течения лейкозного процесса; выделены ДНК и создана база ДНК для дальнейшего секвенирования; проведен подбор и определение гомологичных праймеров к аллелям гена BoLA-DRB3 к BLV; разработан протокол ПЦР и ПЦР-ПДРФ для идентификации аллельных вариантов гена устойчивости BoLA-DRB3 к BLV.

Қазақстан Республикасының аумағында ірі қара малдың лейкозының таралу деңгейіне және лейкоз процесінің ерекшеліктеріне баға берілді; жануарлардың эксперименттік топтары құрылды; зерттеудің серологиялық, гематологиялық және молекулалық-генетикалық әдістерімен лейкоз диагностикасы жүргізілді; эксперименттік жануарлар лейкоз процесінің клиникалық сатысы бойынша сараланды; ДНҚ бөлінді және одан әрі реттілік үшін ДНҚ базасы құрылды; BLV үшін BoLA-DRB3 генінің аллельдеріне гомологиялық праймерлерді таңдау және анықтау жүргізілді; BoLA-DRB3 к BLV төзімділік генінің аллельді нұсқаларын анықтау үшін ПТР және ПТР-РФҰП хаттамасы әзірленді.

В разработке оздоровительных мероприятий с учетом полученных знаний о полиморфизме гена BoLA-DRB3 и влияния уровня провирусной нагрузки у животных разводимых на территории Республики и включения животных-носителей предпочтительных аллелей гена BoLA-DRB3 в селекционные программы.

BoLA-DRB3 генінің полиморфизмі және Республика аумағында өсірілетін жануарлардағы провирустық жүктеме деңгейінің әсері және селекциялық бағдарламаларға BoLA-DRB3 генінің таңдаулы аллельдерін тасымалдаушы жануарлардың қосылуы туралы алынған білімді ескере отырып, сауықтыру іс-шараларын әзірленуде.

Данные исследования позволят создать перспективные разработки и научно-обоснованую систему ранней оценки наследственной устойчивости крупного рогатого скота разных пород к лейкозу за счет применения в качестве генетических маркеров гена BoLA-DRB3.

Зерттеу деректері BoLA-DRB3 генінің генетикалық маркерлері ретінде қолдану арқылы әртүрлі тұқымды ірі қара малдың лейкозға тұқым қуалайтын төзімділігін ерте бағалаудың перспективалық әзірлемелері мен ғылыми негізделген жүйесін құруға мүмкіндік береді

Заключается в получении новых фундаментальных знаний о характере взаимодействия генотип - среда при формировании иммунного ответа на возбудителя лейкоза крупного рогатого скота.

Бұл ірі қара лейкозының қоздырғышына иммундық жауапты қалыптастыру кезінде генотип - ортаның өзара әрекеттесу сипаты туралы жаңа іргелі білім алудан тұрады.

Ветеринария, биология, животноводство, молекулярная генетика.

Ветеринария, биология, мал шаруашылығы, молекулярлық генетика.

UDC indices
619:578.828.11:636.2
International classifier codes
68.41.41; 68.41.53; 68.41.63; 68.41.67; 68.41.05;
Key words in Russian
вирус; провирусная нагрузка; лейкоз крупного рогатого скота; полиморфизм; устойчивость;
Key words in Kazakh
вирус; провирустық жүктеме; ірі қара мал лейкозы; полиморфизм; төзімділікті;
Head of the organization Шакешев Бекбулат Темержанович Кандидат технических наук / нет
Head of work Канатбаев Серик Ганиевич Доктор биологических наук / профессор