The object of research, development or design (in Russian) : Иммунореактивные белки T.annulata

The object of research, development or design (in Kazakh) : T.annulata-ның иммунореактивті ақуыздары

Aim of work (in Russian) : Целью проекта является разработка ИФА тест-системы для диагностики тейлериоза КРС и мониторинг экстенсивности инвазии среди животных неблагополучных регионов с оценкой вероятности распространения в благополучные районы.

Aim of work (in Kazakh) : Жобаның мақсаты ІҚМ тейлериозын диагностикалауға арналған ИФТ тест-жүйесін әзірлеу және қолайсыз өңірлердегі жануарлар арасында инвазияның ауқымдылығын бақылау, қолайлы аудандарға таралу ықтималдығын бағалау болып табылады.

Методы исследования (на русском) : При проведении исследований применялись иммунологические и молекулярно-генетические методы исследований.

Методы исследования (на казахском) : Зерттеу барысында иммунологиялық және молекулалық-генетикалық зерттеу әдістері қолданылды.

Obtained results and novelty (in Russian) : Определены параметры постановки ИФА с использованием рекомбинантного TaSP антигена. В работе были использованы пробы плазмы крови крупного рогатого скота из хозяйств неблагополучного по тейлериозу региона . В использованных образцах крови методом ПЦР, было определено наличие или отсутствие ДНК T.annulata. Тестирование показало, что использованный в качестве антигена рекомбинантный белок TaSP, сероактивен и позволяет определять специфические антитела в пробах крови. Для получения пироплаз T. annulata, использовали цельную кровь от животных в острой фазе инфекции, с подтвержденной с помощью ПЦР моноинвазией. Эритроцитарную массу использовали для получения пироплазм. Для препаративной наработки шизонтов проводили культивирование пораженных лимфоцитов при 37С при 5%СО2 в среде RPMI с 20% фетальной бычьей сыворотки крови. Лимфоциты использовали для получения шизонтов. В лизатах шизонтов и пироплазм T.annulata определяли серопозитивные протеины с помощью 2Д электрофореза и иммуноблоттинга с сыворотками крови от КРС с острой стадией тейлериоза и реконвалесцентов. На основе результатов масс-спектрометрического анализа были определены иммунологически активные протеины. Аминокислотные последовательности данных протеинов были использованы для идентификации генов в доступных полногеномных данных. Проведен сбор 7058 образцов крови КРС, из населенных пунктов семнадцати регионов Казахстана. Создана коллекция проб ДНК и соответствующих им проб плазмы крови.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Рекомбинантты Tasp антигенін қолдана отырып, тейлериозды серологиялық диагностикалау үшін ИФТ параметрлері анықталды. Зерттеу барысында тейлериоз ауруы бойынша қолайсыз аймақтарындағы шаруашылықтарынан алынған ірі қара малдың қан плазмасының сынамалары пайдаланылды. ПТР әдісімен қолданылған қан үлгілерінде T. annulata ДНҚ-ның болуы немесе болмауы анықталды. Тестілеу антиген ретінде қолданылған рекомбинантты Tasp ақуызының сероактивті екенін және қан үлгілеріндегі арнайы антиденелерді анықтауға мүмкіндік беретінін көрсетті. T. annulata-ның пироплазмаларын алу үшін, ПТР көмегімен расталған, моноинвазиясы бар, инфекцияның өткір кезеңінде жануарлардан алынған қан қолданды. Пироплазмаларды алу үшін эритроциттік масса қолданылды. Шизонттардың препараттық әзірлеу үшін зақымдалған лимфоциттер 20% ұрықтың ірі қара сарысуы бар RPMI ортасында 5% СО2 бар 37С температурада өсірілді. Шизонттарды алу үшін лимфоциттер пайдаланылды. T. annulata-ның шизонт пен пироплазма лизаттарында тейлериоздың реконвалесценттердің өткір сатысы бар ІҚМ қан сарысулары 2Д электрофорез және иммуноблоттинг көмегімен серопозитивті ақуыздарды анықтады. Масс-спектрометриялық талдау нәтижелері негізінде иммунологиялық белсенді ақуыздар анықталды. Толық гендерді анықтау үшін геномдық деректердегі ақуыз деректерінің аминқышқылдарының тізбегі пайдаланылды. Қазақстанның он жеті өңірінің елді мекендерінен ІҚМ қанының 7058 үлгісі жиналды. ДНҚ үлгілері мен оларға сәйкес келетін қан плазмасы үлгілерінің жинағы жасалды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Проведена идентификация иммуногенных протеинов T.annulata и определены кодирующие их гены.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Иммуногендік T. annulata ақуыздарын анықтау жүргізілді және оларды кодтайтын гендер анықталды.

Level of implementation (in Russian) :

Level of implementation (in Kazakh) :

Efficiency (in Russian) : Использование иммуногенных протеинов T.annulata позволит повысить специфичность серологических исследований

Efficiency (in Kazakh) : T. annulata-ның иммуногендік ақуыздарын қолдану серологиялық зерттеулердің ерекшелігін арттырады

Field of application (in Russian) : ветеринария

Field of application (in Kazakh) : ветеринария