The object of research, development or design (in Russian) : рекомбинантный белок S.abortus equi

The object of research, development or design (in Kazakh) : S.abortus equi рекомбинантты ақуыз

Aim of work (in Russian) : Создание штаммов E.coli, продуцирующих рекомбинантный белок S.abortus equi

Aim of work (in Kazakh) : Рекомбинантты S. abortus equi ақуызын өндіретін E. coli штамдарын құру

Методы исследования (на русском) : молекулярно-генетические, иммунологические, серологические

Методы исследования (на казахском) : молекулалық-генетикалық, иммунологиялық, серологиялық

Obtained results and novelty (in Russian) : секвенированы геномы 6 изолятов S.enterica выделенных из патологического материала (аборт плоды) и биологического материала кобыл. Получено 1273672, 1463230, 2793878, 1429426, 869054 и 2023166 прочтений для изолятов S-enterica-Kaz-1-LPG-231, S-enterica-Kaz-3-LPG-235, S-enterica-1-S21R-48, S-enterica-1-S22R-47, S-enterica-NRCV-LPG-664 и S-enterica-NRCV-LPG-665. Определены консервативные иммунодоминантные эпитопы и нуклеотидные последовательности генов, ответственные за синтез диагностически важных эпитопов S.аbortus equi. Разработаны схемы генетических конструкций на основе векторов pRSET-B, и рЕТ32 несущие ген OmpX белка S. abortus equi. В pET28 векторе ген OmpX белка встроен по сайтам рестрикции EcoRI и BamHI. В плазмидном векторе pET32 ген OmpX встроен по сайтам рестрикции NcoI и XhoI. Создан штамм E.coli, продуцирующий рекомбинантный белок OmpX. Синтезированы праймеры длиной 25 пар оснований, позволяющие амплифицировать ген OmpX длинной 165 пар оснований из образцов тотальной ДНК. Проведено клонирование гена OmpX в вектор pRSET-B по сайтам рестрикции EcoRI и BamHI. Очистка рекомбинантных белков проведена металл-хелатной хроматографией на основе никель-сефарозы, получены очищенные препараты антигенов. Проведена иммунизация мышей линии Balb/c препаратами рекомбинантных антигенов OmpX, от которых выделены иммунные спленоциты и проведена их гибридизация с клетками миеломной линии. Отобрано 10 гибридных клонов, продуцирующих антитела заданной специфичности.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Патологиялық материалдан (аборт ұрығы) және биелердің биологиялық материалынан бөлінген 6 S.enterica изолятының геномы секвенирленді. S-enterica-Kaz-1-LPG-231, S-enterica-Kaz-3-LPG-235, S-enterica-1-S21R-48, S-enterica-1-S22R-47, S-enterica-NRCV-LPG-664 және S-enterica-NRCV-LPG-665 изоляттары үшін 1273672, 1463230, 2793878, 1429426, 869054 және 2023166 оқулар алынды. Диагностикалық маңызды S.аbortus equi эпитоптарының синтезіне жауап беретін консервативті иммундық доминантты эпитоптар және гендердің н.т. анықталды. S. abortus equi протеинінің OmpX генін тасымалдаушы pRSET-B және pET32 векторлары негізіндегі генетикалық құрылымдардың схемалары әзірленді. pET28 векторында OmpX ақуыз гені EcoRI және BamHI, ал pET32 плазмидтік векторында OmpX гені NcoI және XhoI рестрикция сайтттары арқылы енгізіледі. Рекомбинантты OmpX протеинін өндіретін E.coli штаммы жасалды. Ұзындығы 25 негіз жұбы болатын праймерлер синтезделді, бұл ДНҚ жалпы үлгілерінен ұзындығы 165 негіз жұбы болатын OmpX генін амплификациялайды. OmpX гені EcoRI және BamHI рестрикция сайттары pRSET-B векторына клондалды. Рекомбинантты ақуыздарды тазарту никель-сефароза негізіндегі металл-хелат хроматографиясы арқылы жүргізілді, антигендердің тазартылған препараттары алынды. Balb/c тышқандары рекомбинантты OmpX антигендерінің препараттарымен иммунизацияланды, олардан иммундық спленоциттер бөлініп, миелома жасушаларымен будандастырылды. Таңдалған 10 гибридті клондар қажетті телімділікке ие АД өндіреді.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Штамм E.coli, продуцирующий рекомбинантный белок OmpX, который обладает высокой продуктивностью.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Өнімділігі жоғары рекомбинантты OmpX ақуызын өндіретін E. coli штаммы.

Level of implementation (in Russian) :

Level of implementation (in Kazakh) :

Efficiency (in Russian) :

Efficiency (in Kazakh) :

Field of application (in Russian) : ветеринарная диагностика

Field of application (in Kazakh) : ветеринарная диагностика