The object of research, development or design (in Russian) : Гексаплойдная пшеница (Triticum aestivum)

The object of research, development or design (in Kazakh) : Гексаплойдты бидай (Triticum aestivum)

Aim of work (in Russian) : Характеристика TOR сигнального комплекса пшеницы путем определения его компонентов и функционального анализа TaTOR комплекса.

Aim of work (in Kazakh) : Бидай TOR сигналдық кешеніне, оның компоненттерін айқындау және TaTOR кешеніне функционалды талдау жасау арқылы сипаттау.

Методы исследования (на русском) : Бактериальная трансформация и экспрессия белков; Быстрая жидкостная хроматография белков (FPLC), Аффинная хроматография; Иммунизация кроликов и очистка поликлональных антител протеин А агарозой; Непрямой ELISA метод; ДНС-ПААГ; Вестерн-блоттинг; Иммунопреципитация.

Методы исследования (на казахском) : Бактериялық трансформация және белоктардың экспрессиясы; Белоктардың жылдам сұйық хроматографиясы (FPLC), аффиндік хроматография; Қояндарды иммундау және поликлоналды антидене протеин А агарозамен тазарту; Жанама ELISA әдісі; ДНС-ПААГ электрофорезі; Вестерн-блоттинг; Иммунопреципитация.

Obtained results and novelty (in Russian) : Были экспрессированы и очищенны с помощью аффинной хроматографии специфичные эпитопы 6xHis-rTaTOR1, 6xHis-rTaRAPTOR1 и 6xHis-rTaLST8 белков. Получены и очищенны специфические антитела против TaTOR1, TaRAPTOR1 и TaLST8 белков пшеницы. Определены титры полученных антисывороток с помощью непрямого ИФА. Анализ специфичности очищенных антител методом иммуноблоттинга показал, что антитела распознают соответствующие белки при разведений 1:10000. Результат дот-блот лизатов E coli с 6xHis-rTaTOR1, 6xHis-rTaRAPTOR1 и 6xHis-rTaLST8 белками или их очищенных фракций показал сильные сигналы с поликлональными антителами. Методом иммунопреципитации с использованием поликлональных антител в клеточном лизате E coli с использованием G-протеин агарозных шариков удалось осадить белки с соответствующими молекулярными массами. Показано присутствие TaTOR1, TaRAPTOR1 и TaLST8 белков в различных органах пшеницы методом вестерн-блоттинга. Проведена оптимизация функциональной экспрессии кДНК генов GST-TOR-HEAT и GST-TaS6K1 и очистка белковых продуктов клонируемых генов на основе аффинной хроматографии при помощи GSTrap FF колонок. Методом иммунопреципитации в условиях in vitro показано, что TOR и RAPTOR взаимодействуют через HEAT-повторы TOR киназы. Результаты анализа взаимодействия TaS6K1 и TaRAPTOR показало, что TaRAPTOR взаимодействует с N-концевой последовательностью TаS6K1.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : 6xHis-rTaTOR1, 6xHis-rTaRAPTOR1 және 6xHis-rTaLST8 протеиндерінің спецификалық эпитоптары экспрессияланды және аффиндік хроматографияның көмегімен тазартылды. Бидайдың TaTOR1, TaRAPTOR1 және TaLST8 белоктарына қарсы спецификалық антиденелер алынды және тазартылды. Алынған антисарысулардың титрі ИФС арқылы анықталды. Тазартылған антиденелердің иммуноблоттинг әдісі арқылы сараптамасы өздеріне сәйкес протеиндерді 1:10000 қатынасында танитындығын көрсетті. E coli лизаттарын 6xHis-rTaTOR1, 6xHis-rTaRAPTOR1 және 6xHis-rTaLST8 протеиндерімен немесе тазартылған фракцияларымен дот-блоттинг нәтижелері поликлоналды антиденелермен жақсы сигнал беретіндігін көрсетті. Поликлоналды антиденелерді қолдана отырып иммунопреципитация әдісі арқылы G-протеин агарозды шариктерін E. coli лизатында қолданғанда молекулалық массалары сәйкес келетін протеиндерді тұнбаға түсірілді. TaTOR1, TaRAPTOR1 және TaLST8 протеиндерінің бидайдың түрлі мүшелерінде бар екендігі вестерн-блоттинга әдісі көмегі арқылы көрсетілді. GST-TOR-HEAT және GST-TaS6K1-дің кДНҚ гендерінің функционалды экспрессиясы мен клондалған гендердің протеиндік өнімдерін аффиндік хроматография әдісімен GSTrap FF колонкаларында тазартылуы оңтайландырылды. In vitro жағдайында иммунопреципитация әдісі көмегімен TOR және RAPTOR, HEAT-қайталамасы арқылы TOR киназасымен байланысатындығы көрсетлді. TaS6K1 мен TaRAPTOR өзара әрекеттесуін сараптау нәтижелері TaRAPTOR TаS6K1-дің N соңындағы тізбегімен әрекеттесетіндігін көрсетті.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Проект фундаментального характера. Предлагаемый проект направлен на изучение роли TORC1 сигнальной системы в регуляции роста и развития растений.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Проект Іргелі ғылым бағытына жатады. Ұсынылған жоба өсімдіктердің өсуі мен дамуын реттеудегі TORC1 сигналдық жүйесінің рөлін зерттеуге бағытталған.

Level of implementation (in Russian) :

Level of implementation (in Kazakh) :

Efficiency (in Russian) :

Efficiency (in Kazakh) :

Field of application (in Russian) : Селекция и биотехнологии сельскохозяйственных растений.

Field of application (in Kazakh) : Селекция және ауыл-шаруашылық өсімдіктер биотехнологиясы