Inventory number | IRN | Number of state registration | ||
---|---|---|---|---|
0322РК00428 | AP14870156-KC-22 | 0122РК00274 | ||
Document type | Terms of distribution | Availability of implementation | ||
Краткие сведения | Gratis | Number of implementation: 0 Not implemented |
||
Publications | ||||
Native publications: 0 | ||||
International publications: 0 | Publications Web of science: 0 | Publications Scopus: 0 | ||
Patents | Amount of funding | Code of the program | ||
0 | 10437309 | AP14870156 | ||
Name of work | ||||
Получение продуцентов моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций | ||||
Type of work | Source of funding | Report authors | ||
Applied | Боровиков Сергей Николаевич | |||
0
2
2
0
|
||||
Customer | МНВО РК | |||
Information on the executing organization | ||||
Short name of the ministry (establishment) | МНВО РК | |||
Full name of the service recipient | ||||
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии" | ||||
Abbreviated name of the service recipient | ТОО "Национальный центр биотехнологии" | |||
Abstract | ||||
Объектом исследования являются продуценты моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров предназначенные для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций. Зерттеу нысаны вирустық және бактериалық жұқпалы ауруларды емдеу үшін арналған ірі қара малдың CTLA-4 пен PD-L1 рецепторларына қарсы моноклоналды антиденелерді өндіруші болып табылады. Целью проекта в 2022 году является получение штамм-продуцентов рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота. Жобаның 2022 жылға қойған мақсаты ірі қара мал иммунды жүйе жасушаларынын CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменін өндіруші штамдарын алу болып табылады. В процессе работы использовались методы генетической инженерии, а также иммунологические, биохимические и биотехнологические методы исследования. Жұмыс барысында гендік инженерия әдістері, сонымен қатар иммунологиялық, биохимиялық және биотехнологиялық зерттеу әдістері қолданылды. В результате дизайна, на основе экспрессионного вектора pET28 были спроектированы две генетические конструкции содержащие гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота. Гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота синтезирован в условиях de novo длинной 600 и 400 пароснований, соответственно. Секвенирование синтезированного гена показало 100% совпадение с прогназируемой нуклеотидной последовательностью. Синтезированные гены клонирован в экспрессионную плазмиду pET28 и наработаны в концентрации 208 - 328 нг/мкл, объемом 200 мкл. В результате трансформации клеток кишечной палочки штамма BL21 генетическими конструкциями pET28/PD-1 и pET28/CTLA-4 получены штаммы продуценты E.coli BI21/pET28/PD-1 и E.coli BL21/pET28/CTLA-4. Штаммы клеток стабильно продуцировали рекомбинантные белки молекулярная масс белков составила 21 и 34 кДа соответствующие прогнозируемой массе искомых белков. Получены очищенные препараты рекомбинантных CTLA-4 и PD-L1 белков крупного рогатого скота. Новизна результатов: в первые в республике получены штамм-продуцентов рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота. Дизайн нәтижесінде pET28 экспрессиялық векторының негізінде ірі кара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторлардың жасудан тыс домендерінің гендері бар екі генетикалық құрылымы жобаланған. Ірі қара малдың CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасудан тыс домендері, тиісінше, ұзындығы 400 және 600 нуклеотид de novo жағдайында синтезделген. Синтезделген геннің сиквенс көрсеткіштері болжамды нуклеотид реттілігіне 100% сайкестілігін көрсетті. Синтезделген гендер pET28 экспрессиялық плазмидасына клондалған және көлемі 200 мкл 208 - 328 нг/мл концентрациясында жинақталған. pET28/PD-1 және pET28/CTLA-4 генетикалық конструкциялары арқылы BL21 штамының E. coli жасушаларының трансформациясы нәтижесінде E. coli BL21/pET28/PD-1 және E. coli BL21/pET28/CTLA-4 өндіруші штамдары алынды. Жасуша штамдары рекомбинантты ақуыздарды тұрақты түрде өндірді ақуыздардың молекулалық салмағы 21 және 34 кДа құрады, олар ізделген ақуыздардың болжамды массасына сәйкес келеді. Ірі қара малдың рекомбинантты CTLA-4 және PD-L1 ақуыздарының тазартылған препараттары алынды. Зерттеу нәтижесінің жаңалығы Қазақстан Республикасында алғашқы рет ірі қара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменің өндіруші штамдары алынды. Штаммы микроорганизмов, продуценты рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов крупного рогатого скота, обладают высокой продуктивностью. Негізгі конструктивті және техникалық-пайдалану көрсеткіштері: штамм микроорганизмдер, ірі қара малдың CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының рекомбинантты жасушадан тыс домендерінің өндірушілері жоғары өнімділікке ие. Проект на стадии разработки. Жоба әзірленуде. Эффективность разработки определяется высокой продуктивной способностью штаммов микроорганизмрв, продуцирующих рекомбинантные внеклеточные фрагменты CTLA-4 и PD-L1 рецепторы крупного рогатого скота. Дамудың тиімділігі ірі қара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменің өндіруші штамдары жоғары өнімділік белсенділігімен анықталады. Ветеринария Ветеринария |
||||
UDC indices | ||||
57.088.2; 571.27;619 | ||||
International classifier codes | ||||
34.43.17; | ||||
Key words in Russian | ||||
рекомбинантный антиген; CTA-4; PD-L1; моноклональные антитела; иммунитет; хронические инфекции; | ||||
Key words in Kazakh | ||||
рекомбинантты антиген; CTA-4; PD-L1; моноклоналды антидене; иммунитет; созылмалы жұқпа; | ||||
Head of the organization | Раманкулов Ерлан Мирхайдарович | Ph.D / Профессор | ||
Head of work | Боровиков Сергей Николаевич | Кандидат биологических наук / доцент |