Inventory number IRN Number of state registration
0322РК00428 AP14870156-KC-22 0122РК00274
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 10437309 AP14870156
Name of work
Получение продуцентов моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций
Type of work Source of funding Report authors
Applied Боровиков Сергей Николаевич
0
2
2
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Объектом исследования являются продуценты моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров предназначенные для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций.

Зерттеу нысаны вирустық және бактериалық жұқпалы ауруларды емдеу үшін арналған ірі қара малдың CTLA-4 пен PD-L1 рецепторларына қарсы моноклоналды антиденелерді өндіруші болып табылады.

Целью проекта в 2022 году является получение штамм-продуцентов рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота.

Жобаның 2022 жылға қойған мақсаты ірі қара мал иммунды жүйе жасушаларынын CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменін өндіруші штамдарын алу болып табылады.

В процессе работы использовались методы генетической инженерии, а также иммунологические, биохимические и биотехнологические методы исследования.

Жұмыс барысында гендік инженерия әдістері, сонымен қатар иммунологиялық, биохимиялық және биотехнологиялық зерттеу әдістері қолданылды.

В результате дизайна, на основе экспрессионного вектора pET28 были спроектированы две генетические конструкции содержащие гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота. Гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота синтезирован в условиях de novo длинной 600 и 400 пароснований, соответственно. Секвенирование синтезированного гена показало 100% совпадение с прогназируемой нуклеотидной последовательностью. Синтезированные гены клонирован в экспрессионную плазмиду pET28 и наработаны в концентрации 208 - 328 нг/мкл, объемом 200 мкл. В результате трансформации клеток кишечной палочки штамма BL21 генетическими конструкциями pET28/PD-1 и pET28/CTLA-4 получены штаммы продуценты E.coli BI21/pET28/PD-1 и E.coli BL21/pET28/CTLA-4. Штаммы клеток стабильно продуцировали рекомбинантные белки молекулярная масс белков составила 21 и 34 кДа соответствующие прогнозируемой массе искомых белков. Получены очищенные препараты рекомбинантных CTLA-4 и PD-L1 белков крупного рогатого скота. Новизна результатов: в первые в республике получены штамм-продуцентов рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота.

Дизайн нәтижесінде pET28 экспрессиялық векторының негізінде ірі кара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторлардың жасудан тыс домендерінің гендері бар екі генетикалық құрылымы жобаланған. Ірі қара малдың CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасудан тыс домендері, тиісінше, ұзындығы 400 және 600 нуклеотид de novo жағдайында синтезделген. Синтезделген геннің сиквенс көрсеткіштері болжамды нуклеотид реттілігіне 100% сайкестілігін көрсетті. Синтезделген гендер pET28 экспрессиялық плазмидасына клондалған және көлемі 200 мкл 208 - 328 нг/мл концентрациясында жинақталған. pET28/PD-1 және pET28/CTLA-4 генетикалық конструкциялары арқылы BL21 штамының E. coli жасушаларының трансформациясы нәтижесінде E. coli BL21/pET28/PD-1 және E. coli BL21/pET28/CTLA-4 өндіруші штамдары алынды. Жасуша штамдары рекомбинантты ақуыздарды тұрақты түрде өндірді ақуыздардың молекулалық салмағы 21 және 34 кДа құрады, олар ізделген ақуыздардың болжамды массасына сәйкес келеді. Ірі қара малдың рекомбинантты CTLA-4 және PD-L1 ақуыздарының тазартылған препараттары алынды. Зерттеу нәтижесінің жаңалығы Қазақстан Республикасында алғашқы рет ірі қара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменің өндіруші штамдары алынды.

Штаммы микроорганизмов, продуценты рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов крупного рогатого скота, обладают высокой продуктивностью.

Негізгі конструктивті және техникалық-пайдалану көрсеткіштері: штамм микроорганизмдер, ірі қара малдың CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының рекомбинантты жасушадан тыс домендерінің өндірушілері жоғары өнімділікке ие.

Проект на стадии разработки.

Жоба әзірленуде.

Эффективность разработки определяется высокой продуктивной способностью штаммов микроорганизмрв, продуцирующих рекомбинантные внеклеточные фрагменты CTLA-4 и PD-L1 рецепторы крупного рогатого скота.

Дамудың тиімділігі ірі қара мал CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс рекомбинантты доменің өндіруші штамдары жоғары өнімділік белсенділігімен анықталады.

Ветеринария

Ветеринария

UDC indices
57.088.2; 571.27;619
International classifier codes
34.43.17;
Key words in Russian
рекомбинантный антиген; CTA-4; PD-L1; моноклональные антитела; иммунитет; хронические инфекции;
Key words in Kazakh
рекомбинантты антиген; CTA-4; PD-L1; моноклоналды антидене; иммунитет; созылмалы жұқпа;
Head of the organization Раманкулов Ерлан Мирхайдарович Ph.D / Профессор
Head of work Боровиков Сергей Николаевич Кандидат биологических наук / доцент