The object of research, development or design (in Russian) : Объектом исследования является иммунохроматографическая тест-система для диагностики нодулярного дерматита крупного рогатого скота.

The object of research, development or design (in Kazakh) : Зерттеу нысаны ірі қара малдың нодулярлық дерматит ауруын диагностикалауға арналған иммунохроматографиялық тест жүйесі болып табылады.

Aim of work (in Russian) : Целью исследования на 2022 год является изучение основных характеристик полученного рекомбинантного Р32 антигена вируса нодулярного дерматита, а также получение линий гибридных клеток продуцирующих моноклональные антитела против рекомбинантного Р32 антигена.

Aim of work (in Kazakh) : 2022 жылға арналған зерттеудің мақсаты алынған рекомбинантты Р32 нодулярлық дерматит вирусының антигенінің негізгі сипаттамаларын зерттеу, сондай-ақ рекомбинантты Р32 антигеніне қарсы моноклоналды антиденелер өндіруші гибридті жасушалар желілерін алу болып табылады.

Методы исследования (на русском) : В ходе выполнения проекта использовались методы гибридомной технологии, молекулярные, иммунологические, культуральные, а также микроскопические методы исследования.

Методы исследования (на казахском) : Жобаны орындау барысында гибридомдық технология әдістері, молекулалық, иммунологиялық, культуралдық, сондай-ақ микроскопиялық зерттеу әдістері қолданылды.

Obtained results and novelty (in Russian) : Изучены иммунологические и диагностические свойства рекомбинантного Р32 антигена вируса нодулярного дерматита. Отработана схема иммунизации лабораторных мышей. Титр антител в непрямом ИФА составил 1:6400 для группы 1 (25 мкг/гол) и 1:102400 для группы 2 (50 мгк/гол). Установлено, что использование для иммунизации рекомбинантного антигена в концентрации 100 мкг/гол вызывает токсический эффект и приводит к гибели животных. При постановке непрямого твердофазного ИФА установлено, что рекомбинантный Р32 антиген реагирует с антителами сыворотки крови КРС вакцинированных против нодулярного дерматита. При отработке параметров ИФА определено, что наиболее оптимальная концентрация рекомбинантного Р32 белка составляет 0,6 мкг/мл, блокировочный раствор – 3% молоко, разведение конъюгата 1:20000. Получены линии гибридных клеток продуцирующие моноклональные антитела против Р32 антигена. При посеве 4-х 96-луночных планшетов (384 лунки), было получено 98 (25,5%) клонов гибридных клеток, из которых методом непрямого твердофазного ИФА было выделено 5 (5%) положительных клонов. При дальнейшем тестировании культуральных и продуктивных характеристик отобрано два клона. Отработаны методы наработки и очистки моноклональных антител. Установлено, что при наработке моноклональных антител методом in vitro, концентрация составляет около 43 мкг/мл с 200 мл среды. При наработке методом in vivo концентрация антител составляет около 4-5 мг/мл.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Нодулярлық дерматит вирусының рекомбинантты Р32 антигенінің иммунологиялық және диагностикалық қасиеттері зерттелді. Зертханалық тышқандарды иммундау схемасы жасалды. Жанама ИФТ-дағы антиденелердің титрі 1 топ үшін 1:6400 (25 мкг/тышқан басы) және 2 топ үшін 1:102400 (50 мкг/тышқан басы) болды. 100 мкг/тышқан басы концентрациясында рекомбинантты антигенді иммундау үшін қолданғанда улы әсер ететіні және жануарлардың өліміне әкелетіні анықталды. Жанама қатты фазалы ИФТ қою кезінде рекомбинантты Р32 антигені нодулярлық дерматитке қарсы вакцинацияланған ІҚМ қан сарысуының антиденелерімен әрекеттесетіні анықталды. ИФА параметрлерін пысықтау кезінде рекомбинантты Р32 ақуызының ең оңтайлы концентрациясы 0,6 мкг/мл, бұғаттау ерітіндісі – 3% сүт, конъюгаттық сұйылту - 1:20000 екені анықталды. Рекомбинантты Р32 антигеніне қарсы моноклоналды антиденелер өндіруші гибридті жасушалар желілері алынды. 4-у 96 шұңқыршалы планшеттерді (384 шұңқырша) егу кезінде гибридті жасушалардың 98 (25,5%) клоны алынды, олардың 5 (5%) оң клондары жанама қатты фазалы ИФТ әдісімен оқшауланды. Культуралдық және өнімділік сипаттамаларын одан әрі сынау кезінде екі клон таңдалды. Моноклоналды антиденелерді әзірлеу және тазарту әдістері пысықталды. In vitro әдісімен моноклоналды антиденелер дайындалған кезде 200 мл қоректік ортадан шамамен концентрациясы 43 мкг/мл құрайтыны анықталды. In vivo әдісімен дайындалған кезде антиденелердің концентрациясы шамамен 4-5 мг/мл құрайды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Линии гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела против рекомбинантного Р32 антигена вируса нодулярного дерматита, обладают высокой продуктивностью.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Рекомбинантты Р32 нодулярлық дерматит вирусының антигеніне қарсы моноклоналды антиденелер өндіруші гибридті жасушалар желілері жоғары өнімділікке ие.

Level of implementation (in Russian) : Проект находится на стадии выполнения

Level of implementation (in Kazakh) : Жоба орындалуда

Efficiency (in Russian) : Эффективность разработки определяется продуктивными характеристиками линий гибридных клеток продуцирующих моноклональные антитела против рекомбинантного Р32 антигена вируса нодулярного дерматита крупного рогатого скота.

Efficiency (in Kazakh) : Даму тиімділігі ірі қара малдың нодулярлық дерматит вирусының рекомбинантты Р32 антигеніне қарсы моноклоналды антиденелер өндіруші гибридті жасушалар желілерінің өнімділік сипаттамаларымен анықталады.

Field of application (in Russian) : Ветеринария

Field of application (in Kazakh) : Ветеринария