Inventory number IRN Number of state registration
0222РК00123 AP08053347-OT-22 0120РК00159
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 3 Publications Web of science: 3 Publications Scopus: 3
Number of books Appendicies Sources
1 5 94
Total number of pages Patents Illustrations
96 0 43
Amount of funding Code of the program Table
22341291 AP08053347 4
Name of work
Характеристика и применение ДНК аптамеров для обнаружения карциноэмбрионального антигена
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied research Метод, способ
Report authors
Канаева Дамира Ашимхановна , Юнусова Нигара Хакимжановна , Бекмурзаева Алия Кеншиликовна , Байкен Елдар Дәуренбекұлы , Солтабаева Әйгерім Дәулетбекқызы , Жумабекова Жазира Ержанқызы , Сыпабекова Маржан , Курмангали Асем Келискызы , Шола Дэвид Майкл ,
0
2
2
1
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) Нет
Full name of the service recipient
Nazarbayev University
Abbreviated name of the service recipient NU
Abstract

Одноцепочечные ДНК аптамеры, которые могут избирательно связываться с белком-мишенью - карциноэмбриональным антигеном.

Карциноэмбрионды антигенмен таңдап байланыса алатын бір тізбекті ДНҚ аптамерлері зерттеу нысандары болып табылады.

Характеризация последовательностей ДНК аптамеров против биомаркера СЕА с использованием методов аптамерный анализ сэндвич-энзим-связанного олигонуклеотида, поверхностного плазмонного резонанса и разработка метода на основе электрохимического импеданс сенсора со встроенным электродом для быстрого обнаружения биомаркера рака с помощью иммобилизации ДНК аптамера на IDE.

CEA биомаркеріне қарсы аптамерлердің ДНҚ тізбекті аптамерге негізделген сэндвич- ферментпен байланысты олигонуклеотидті талдау және беттік плазмондық резонанс арқылы сипаттау. Қатерлі ісіктің биомаркерін тез анықтауға арналған аралық электродпен біріктірілген электрохимиялық импеданс сенсорында негізделген әдісті дамыту.

Биоинформатический анализ аптамеров, аптамерный анализ сэндвич-энзим-связанного олигонуклеотида, поверхностного плазмонный резонанс, электрохимическая импедансная спектроскопия.

Аптамерлердің биоинформатикалық анализі, сэндвич-ферментпен байланысқан олигонуклеотидтік аптамерлік анализі, беттік плазмондық резонанс, электрохимиялық импеданс спектроскопия.

За отчетный период (2020–2022 гг.) был проведен биоинформатический анализ аптамерных последовательностей. Также, изучили комплексы при взаимодействии аптамера с белком-мишенью - СЕА. Во время скрининга относительных событий связывания биотинилированных аптамеров (1) – (9) с целевым CEA белком с использованием ELONA, последовательность аптамера (6) показала самое высокое значение OD450. Анализ последовательности аптамера (6) в разных концентрациях выявил увеличение сигнала оптической плотности (OD450) в диапазоне концентрации от 0 до 1500 нМ со значением Kd в наномолярном диапазоне - 311,7 нМ и хорошей специфичностью. В этом исследовании также был использован SPR для дальнейшей оценки последовательности аптамера (6) против целевого белка CEA. Исследование чувствительности EIS показало, что предел детекции CEA в буфере и в разведенных образцах сыворотки крови человека с использованием ЭИС аптасенсора составляет 5,02 пг/мл и 4,92 пг/мл, соответственно, а время детекции составляло всего 25 мин. Мы также изучили поверхность IDE с помощью АСМ, что также дало нам возможность продемонстрировать успешную функционализацию и детекцию СЕА. Результаты конфокальной микроскопии визуально подтвердили связывание последовательности аптамера (6) с белком- мишенью СЕА на клеточных культурах экспрессирующие СЕА.

CEA ақуызы мен (1) - (9) биотинилденген аптамерлердің салыстырмалы байланыстыру оқиғаларын скрининг кезінде, (6) аптамерлік тізбек ең жоғары оптикалық тығыздық мәнін көрсетті. (6) аптамерлік тізбектің әр түрлі концентрацияларын талдау кезінде оптикалық тығыздық сигналының 0 -ден 1500 нМ -ге дейін концентрация диапазонында ұлғаюы анықталды. 750 нМ концентрациясында - үстіртке жетті. (6) аптамердің Kd мәнін бағалағанда - наномолярлық диапазон мәндерін көрсетті - 311,7 нМ. (6) аптамер тізбегі - CEA мақсатты ақуызбен және мақсатты емес ақуыз байланыстылығын зерттегенде - нәтижелері жақсы спецификалық мәндерді көрсетті. Осы зерттеуде сонымен қатар мақсатты CEA ақуызына қарсы аптамердің (6) реттілігін одан әрі бағалау үшін SPR қолданды. Әрі қарай, біз қатерлі ісіктің биомаркерін тез анықтауға арналған EIS негізделген әдісті дамыту үшін аптамердің (6) реттілігін қолдандық. EIS әдісінің сезімталдығын анықтау зерттеулері көрсеткендей, электрохимиялық аптасенсор көмегімен буферде және сұйылтылған адам сарысу үлгілерінде CEA анықтау шегі сәйкесінше 5,02 пг/мл және 4,92 пг/мл екенін және анықтау уақыты небәрі 25 минут екенін көрсетті. Біз сондай-ақ IDE бетін атомдық күштік микроскопия арқылы зерттедік, бұл бізге CEA сәтті функционализациясын және анықтауын көрсетуге мүмкіндік берді. Конфокальды микроскопияның нәтижелері (6) аптамер тізбегінің CEA экспрессиясы бар жасуша дақылдарында CEA мақсатты ақуызымен байланысуын көзбен растады.

Работа по обнаружению ракового биомаркера с использованием электрохимического аптасенсора будет иметь важное положительное влияние в области биосенсинга, предлагая высокую чувствительность обнаружения, обработка небольшого объема и быстрое обнаружение биомаркера. Предлагаемое исследование также может быть адаптирован к другим заболеваниям - как инфекционным, так и неинфекционным - новым устройствам, имеющим коммерческую ценность. Стоимость аптасенсора может считаться более дешевой, чем стоимость иммуносенсоров, поскольку стоимость производства аптамера намного дешевле, чем антител.

Электрохимиялық аптасенсорды қолдана отырып, қатерлі ісіктің биомаркерлерін анықтау бойынша ұсынылған жұмыс биологиялық сенсорлық аймаққа жоғары сезімталдықты, төмен көлемді өңдеуді және сынамаларды тез анықтауды ұсынады. Зерттеу нәтижелері болашақта сонымен бірге басқа ауруларға бейімделуі мүмкін платформаның дамуына әкелуі мүмкін - инфекциялық және инфекциялық емес - коммерциялық маңызы бар жаңа құрылғылар. Аптасенсордың құнын иммуносенсорларға қарағанда арзан деп санауға болады, өйткені аптамер өндірісінің бағасы антиденелерге қарағанда арзанырақ.

Исследование чувствительности EIS показало, что предел детекции CEA в буфере и в разведенных образцах сыворотки крови человека с использованием EIS аптасенсора составляет 5,02 пг/мл и 4,92 пг/мл, соответственно, а время детекции составляло всего 25 мин.

EIS әдісінің сезімталдығын анықтау зерттеулері көрсеткендей, электрохимиялық аптасенсор көмегімен буферде және сұйылтылған адам сарысу үлгілерінде CEA анықтау шегі сәйкесінше 5,02 пг/мл және 4,92 пг/мл екенін және анықтау уақыты небәрі 25 минут екенін көрсетті.

Молекулярная биология, биоинженерия.

Молекулалық биология, биоинженерия.

UDC indices
577.2.08, 573.6
International classifier codes
34.15.05; 34.57.00;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
аптасенсор; обнаружение; аптамер; электрохимическая импедансная спектроскопия; характеристика; поперечно-встречный электрод; биомаркер; рак;
Key words in Kazakh
аптасенсор; анықтау; аптамер; электрохимиялық импеданс спектроскопиясы; сипаттау; аралық электродтар; биомаркер; қатерлі ісік;
Head of the organization Илесанми Адесида Ph.D. / Профессор
Head of work Канаева Дамира Ашимхановна Ph.D. в клеточной и молекулярной биологии / Ассоциированный Профессор
Native executive in charge Юнусова Нигара Хакимжановна Магистр