Inventory number IRN Number of state registration
0321РК00633 AP08052580-KC-21 0120РК00120
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 22700000 AP08052580
Name of work
Производство ПЦР тест-систем для обнаружения видовой фальсификации мясной продукции
Type of work Source of funding Report authors
Applied Абитаева Гуляим Каиркеновна
0
1
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) Нет
Full name of the service recipient
ТОО "Республиканская коллекция микроорганизмов"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "РКМ"
Abstract

Шесть видов ПЦР тест-систем: Набор реагентов «Beef Real-Time PCR» для обнаружения ДНК мяса говядины в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени»; Набор реагентов «Horse Real-Time PCR» для обнаружения ДНК мяса конины в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени»; Набор реагентов «Chicken Real-Time PCR» для обнаружения ДНК курицы в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени» ; Набор реагентов «Turkey Real-Time PCR» для обнаружения ДНК мяса индейки в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени»; Набор реагентов «ID Real-Time PCR tetraplex I» для обнаружения ДНК мяса свиньи/говядины/конины в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени»; Набор реагентов «ID Real-Time PCR tetraplex II» для обнаружения ДНК мяса свиньи/курицы/индейки в продуктах питания методом ПЦР в режиме «реального времени».

ПТР тест-жүйелердің алты түрі: "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдерінде сиыр етінің ДНҚ-сын анықтауға арналған "Beef Real-Time PCR" реагенттер жиынтығы; "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдерінде жылқы етінің ДНҚ-сын анықтауға арналған "Horse Real-Time PCR" реагенттер жиынтығы; "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдеріндегі тауықтың ДНҚ-сын анықтауға арналған "Chicken Real-Time PCR" реагенттер жиынтығы; "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдерінде күркетауық етінің ДНҚ-сын анықтауға арналған "Turkey Real-Time PCR" реагенттер жиынтығы; "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдерінде шошқа/сиыр/жылқы етінің ДНҚ-сын анықтауға арналған “ID real-Time PCR Tetraplex I" реагенттер жиынтығы; "Нақты уақыт" режимінде ПТР әдісімен азық-түлік өнімдерінде шошқа/тауық/күркетауық етінің ДНҚ-сын анықтауға арналған “ID real-Time PCR TETRAPLEX II" реагенттер жиынтығы.

Разработка, производство и реализация 6 видов тест-систем для обнаружения видовой фальсификации пищевой продукции методом полимеразной цепной реакции в режиме «реального времени».

«Нақты уақыт» режимінде полимеразды тізбекті реакция әдісімен тамақ өнімдерінің түрлік бұрмалануын анықтау үшін тест-жүйелердің 6 түрін әзірлеу, өндіру және іске асыру.

Испытания проведены с использованием молекулярно-генетических методов, а именно метода real-time ПЦР с использованием разработанных 6 наборов для обнаружения ДНК мяса животных в продуктах питания «Beef Real-Time PCR», «Horse Real-Time PCR», «Chicken Real-Time PCR», «Turkey Real-Time PCR», «ID Real-Time PCR tetraplex I», «ID Real-Time PCR tetraplex II. Выделение ДНК животных проводили с использованием набора набора PrepMan™ Ultra Sample Preparation Reagent (Applied Biosystems). Концентрацию ДНК оценивали фотометрически (OD260) с использованием спекторофотометра NanoDrop (ThermoFisher). Обьем реакционной смеси составлял 30 мкл, из них ДНК образца в объеме 10 мкл и ПЦР смеси в объеме 20 мкл.

Сынақтар молекулалық-генетикалық әдістерді, атап айтқанда real-time ПТР әдісін қолдана отырып, "Beef real-Time PCR", "Horse Real-Time PCR", "Chicken real-Time PCR", "Turkey Real-Time PCR", "id real-Time PCR TETRAPLEX I", "ID real-Time PCR TETRAPLEX II. Жануарлардың ДНҚ-cын оқшаулау PrepMan™ Ultra Sample Preparation Reagent (Applied Biosystems) жиынтығының көмегімен жүргізілді. ДНҚ концентрациясы NanoDrop (ThermoFisher) спектрофотометрін қолдана отырып, фотометриялық (OD260) бағаланды. Реакциялық қоспаның көлемі 30 мкл, оның ішінде 10 мкл көлемінде ДНҚ және 20 мкл көлемінде ПТР қоспасы болды.

В процессе работы произведена опытная партия шести тест-систем в соответствии с ранее разработанными ПЦР протоколами для проведения дальнейших испытаний по оценке качества готовой продукции. Проведены исследования по оценке чувствительности и специфичности 6 видов ПЦР тест-систем с использованием ПЦР амплификаторов Rotor-Gene Qiagen, Agilent Aria Mix, CFX 96 BioRad. По результатам исследований значимых расхождений в значениях чувствительности и специфичности 6 видов ПЦР тест-систем не обнаружено. Проведены сравнительные испытания на чувствительность и специфичность произведенной опытной партии тест-систем с коммерческими тест-системами компании GEN-IAL (Германия), с использованием контрольных образцов. Результаты исследований показали, что все контрольные образцы, содержащие и не содержащие ДНК животных, были на 100% достоверно идентифицированы как с использованием разработанных ПЦР тест-систем, так и коммерческих ПЦР тест-систем. Проведена внешняя оценке качества готовой продукции посредством участия в межлабораторных сличительных испытаниях с использованием произведенных тест-систем в соответствии с международными требованиями системы менеджмента качества. Разработана нормативно-техническая документация по разработке и производству тест-систем, а именно стандартная операционная процедура и производственный регламент. Готовая продукция не подлежит обязательной сертификации на соответствие требованиям установленным Законодательством РК в области технического регулирования.

Жұмыс барысында дайын өнімнің сапасын бағалау бойынша одан әрі сынақтар жүргізу үшін бұрын әзірленген ПТР хаттамаларына сәйкес алты тест-жүйенің тәжірибелік партиясы жүргізілді. Rotor-Gene Qiagen, Agilent Aria Mix, CFX 96 BioRad ПТР амплификаторларының пайдалана отырып, тест-жүйелердің 6 түрінің сезімталдығы мен ерекшелігін бағалау бойынша зерттеулер жүргізілді. Зерттеу нәтижелері бойынша ПТР тест-жүйелерінің 6 түрінің сезімталдығы мен ерекшелігі мәндерінде елеулі айырмашылықтар табылған жоқ. Бақылау үлгілерін пайдалана отырып, Gen-IAL (Германия) компаниясының коммерциялық ПТР тест-жүйелерімен өндірілген ПТР тест-жүйелерінің тәжірибелік партиясының сезімталдығы мен ерекшелігіне салыстырмалы сынақтар жүргізілді. Зерттеу нәтижелері жануарлардың ДНҚ-сы бар және жоқ барлық бақылау үлгілері әзірленген тест-жүйелерін, сондай-ақ коммерциялық тест-жүйелерін пайдалана отырып 100% сенімді идентификациясын көрсетті. Сапа менеджменті жүйесінің халықаралық талаптарына сәйкес жүргізілген тест-жүйелерді пайдалана отырып, зертханааралық салыстыру сынақтарына қатысу арқылы дайын өнімнің сапасына сыртқы бағалау жүргізілді. Тест-жүйелердің ПТР 6 түрін әзірлеу және өндіру бойынша нормативтік-техникалық құжаттама әзірленді, атап айтқанда стандартты операциялық рәсімі және өндірістік регламент. Дайын өнім техникалық реттеу саласындағы ҚР Заңнамасында белгіленген талаптарға сәйкестігі үшін міндетті сертификаттауға жатпайды.

В результате реализации НИР заложены научно-практические основы для развития производства диагностических систем в целях импортозамещения высокотехнологичной продукции.

Ғылыми зерттеу жұмыстарын жүзеге асыру нәтижесінде жоғары технологиялық өнімдерді импортпен алмастыру мақсатында диагностикалық жүйелер өндірісін дамытудың ғылыми және практикалық негіздері қаланды

Не внедрено

Енгізілмеген

Реализация проекта по разработке, производству и коммерциализации отечественных ПЦР тест-систем позволит снизить стоимость продукции в два раза, расширить ассортимент продукции отечественного производителя, на постоянной основе оказывать научно-методическую поддержку

Отандық ПТР тест-жүйелерін әзірлеу, өндіру және коммерцияландыру жөніндегі жобаны жүзеге асыру өнімнің құнын екі есеге төмендетуге, отандық өндірушінің өнімдер ассортиментін кеңейтуге, тұрақты негізде ғылыми-әдістемелік қолдау көрсетуге мүмкіндік береді.

Молекулярная биология

Молекулалық биология

UDC indices
57.088.1:606
International classifier codes
62.41.09; 34.15.05; 34.15.25;
Key words in Russian
тест-системы; видовая фальсификация; ПЦР; ПЦР в режиме «реального времени».; мясная продукция; производство; ДНК;
Key words in Kazakh
тест-жүйелері; түрлік бұрмалануы; ПТР; нақты уақыттағы ПТР; ет өнімдері; өндіру; ДНҚ;
Head of the organization Сармурзина Зинигуль Сериковна Кандидат биологических наук / Нет
Head of work Абитаева Гуляим Каиркеновна Phd / нет