Inventory number IRN Number of state registration
0321РК00220 AP09259754-KC-21 0121РК00273
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 1
International publications: 1 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 18598050.85 AP09259754
Name of work
Молекулярная характеристика TORC1 сигнального пути Triticum aestivum и их значения в контроле прорастания зерна пшеницы
Type of work Source of funding Report authors
Fundamental Смекенов Изат Темиргалиевич
0
1
2
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Некоммерческое акционерное общество "Казахский национальный университет имени аль-Фараби"
Abbreviated name of the service recipient НАО "КазНУ им. аль-Фараби"
Abstract

Гексаплойдная пшеница (Triticum aestivum)

Гексаплойдты бидай (Triticum aestivum)

Выделение и молекулярная характеристика предполагаемых генов T. aestivum, кодирующих компоненты TORC1 сигнального пути, то есть TOR, Raptor и LST8, а также анализ их экспрессии.

TORC1 сигналдық жүйесінің компоненттерін, яғни TOR, Raptor және LST8 кодтайтын T. aestivum гендерін бөліп алу және молекулалық сипаттама жасап, ол гендердің экспрессиясын талдау.

Выделение и клонирование генов кДНК, ОТ-ПЦР, ПЦР в реальном времени, агарозный гель электрофорез, ДНС-ПАГ электрофорез, аффинная хроматография.

КДНҚ гендерін бөліп алу және клондау, КТ-ПТР, сандық ПТР, агорозалық гель-электрофорез, ДНС-ПАГ электрофорез, аффиндік хроматография.

Идентифицированы эволюционно консервативные компоненты сигнального пути TOR у яровой мягкой пшеницы: TaTOR, TaRaptor и TaLST8. Последовательность белков TaTOR, TaRaptor и TaLST8 показали сходную организацию доменов, как у арабидопсиса, человека и дрожжей. Филогенетический анализ и выравнивание последовательности киназного домена с последовательностью из других репрезентативных организмов показали, что TaTOR является эволюционно консервативными. Анализ экспрессии показал, что TaTOR, TaRaptor и TaLST8 относительно на высоком уровне экспрессируются в 3–21 дневных листовых пластинках и корнях, чем в метелках, которые содержат много меристем. Впервые выделены кДНК гены предполагаемых белков TaTOR, TaRAPTOR и TaLST8 с применением реакции обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции. Сконструированы вектора экспрессии укороченных вариантов генов TaTOR, TaRAPTOR и TaLST8, содержащие 6xHis-метку на N-конце белков. Наиболее растворимые укороченные варианты TOR, RAPTOR и LST8 белков был получен путем продукции белка в E. coli ArcticExpress (DE3) компетентных клетках в качестве клетки-хозяина. Растворимый рекомбинантный 6xHis- TaTOR, TaRAPTOR и TaLST8 белки легко очищался с помощью аффинной хроматографии и можно использовать в качестве иммуногена для получения поликлональных антител против TOR, RAPTOR и LST8.

Жұмсақ бидайдың эволюциялық консервативті TOR сигналдық жүйесінің TaTOR, TaRaptor және TaLST8 компоненттері айқындалды. TaTOR, TaRaptor және TaLST8 белоктарының аминқышқылдық тізбегі арабидопсис, адам және ашытқы клеткаларындағыдай ұқсас домендік деңгейде ұйымасатынын көрсетті. Филогенетикалық талдау және киназа доменін басқа репрезентативті организмдердегі аминқышқылдық тізбегімен салыстыру, TaTOR киназаның эволюциялық тұрғыда консервативтілігін анықтады. TaTOR, TaRaptor және TaLST8 гендерінің экспрессиясын зерттеу нәтижелері, олардың 3-21 күндік бидай өсінділерінде мен тамырларында салыстырмалы түрде жоғары деңгейде экспрессияланатынын көрсетті. Алғаш рет болжамды TaTOR, TaRAPTOR және TaLST8 белоктарының кДНҚ гендері кері транскрипция реакциясы және полимеразды тізбекті реакция көмегімен бөлініп алынды. Белоктардың N-соңында 6xHis-таңба бар TaTOR, TaRAPTOR және TaLST8 гендерінің қысқартылған нұсқаларының экспрессиялаушы векторлары құрастырылды. Ерігіштігі жоғары TOR, RAPTOR және LST8 белоктарының қысқартылған нұсқалары E. coli ArcticExpress (DE3) клеткаларын қожайын-клетка ретінде пайдаланғанда мүмкін болды. Ерігіштігі жоғары 6xHis-6xHis- TaTOR, TaRAPTOR и TaLST8 аффинді хроматография арқылы оңай тазартылды және оларды поликлондық антиденелерді алу үшін иммуноген ретінде пайдаланылуға болады.

Проект фундаментального характера. Предлагаемый проект направлен на изучение роли TORC1 сигнальной системы в регуляции роста и развития растений.

Проект Іргелі ғылым бағытына жатады. Ұсынылған жоба өсімдіктердің өсуі мен дамуын реттеудегі TORC1 сигналдық жүйесінің рөлін зерттеуге бағытталған.

Селекция и биотехнологии сельскохозяйственных растений.

Селекция және ауыл-шаруашылық өсімдіктер биотехнологиясы

UDC indices
577. 24; 577. 21; 57.052
International classifier codes
34.15.27;
Key words in Russian
raptor; lst8; α-амилаза; пшеница; мишень рапамицина; экспрессия генов; аффинная хроматография;
Key words in Kazakh
raptor; lst8; α-амилаза; бидай; рапамицин нысанасы; гендер экспрессиясы; аффиндік хроматография;
Head of the organization РАМАЗАНОВ ТЛЕККАБУЛ САБИТОВИЧ доктор физ.-мат.наук / профессор
Head of work Смекенов Изат Темиргалиевич Степень доктора философских наук (PhD) / нет