Inventory number IRN Number of state registration
0220РК01159 AP05133823-OT-20 0118РК00967
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Number of books Appendicies Sources
1 4 25
Total number of pages Patents Illustrations
54 0 11
Amount of funding Code of the program Table
5000000 AP05133823 1
Name of work
Изучение хитин и β-глюкан-связывающих ферментов при патогенезе и их использование в тестировании устойчивости пшеницы к фузариозу
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Fundamental Метод, способ
Report authors
Хакимжанов Айдар Атымтаевич , Кузовлев Владимир Анатольевич , Абайлдаев Әсет Оразалыұлы ,
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения "Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина"
Abbreviated name of the service recipient РГП на ПХВ "Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина"
Abstract

Зерна, корни, стебли проростков пшеницы (Triticum aestivum L.), гриб F. graminearum.

Бидай өскіндерінің тамыры, сабағы мен дәндері (Triticum aestivum L.), саңырауқұлақ F. graminearum.

Выявление и характеристика хитин и β-глюкан-связывающих ферментов для применения в тестировании устойчивости сортов пшеницы к фузариозу

Бидай сұрыптарының фузариумға төзімділігін сынауға хитин және β-глюканмен байланысатын ферменттерді анықтау және сипаттау.

Аффинная хроматография, изоэлектрофокусирование (ИЭФ), SDS-ПАГ электрофорез, спектрофотометрия, культивирование гриба.

Афиндік хроматография, изоэлектрлік фокустау (ИЭФ), НДС-ПАГ электрофорезі, спектрофотометрия, саңырауқұлақты дақылдау.

Получены очищенные хитин связывающая хитиназа (ХС) и β-глюкан связывающая (ГС) β-1,3-глюканаза проростков пшеницы, определены их физико-химические свойства. Изоферменты ХС хитиназы имели широкий спектр pI от 4,.3 до 9.0, М.в. соответствовал 28, 33 и 35 кДа. ГС β-1,3-глюканаза включала изоформы с pI от 5.0 до 9.3. Оптимум рН обоих ферментов 5.0-5.5, температурный оптимум-от 30 до 40оС. Оба фермента сохраняли активность после прогрева 60оС 10 мин. Удельная активность ферментов и их гетерогенность при ИЭФ в корнях, стеблях и листьях была выше, чем в зерне. Наибольший активирующий эффект на β-1,3-глюканазу и хитиназу проростков пшеницы оказывал культуральный фильтрат (КФ) 6-недельной культуры гриба, а наименьший – 2-недельный КФ. Для 4 и 6-недельного КФ был характерен 2-х фазный временной фермент-активирующий эффект. Хитозанолигосахарид в малой дозе (0,01 мг/мл) сильно индуцировал в проростках β-1,3-глюканазу и хитиназу. Ламинарин оказывал наиболее продолжительный эффект с 2-3 пиками активности ферментов. В проростках 26 сортов пшеницы выявлена существенная вариабельность в уровне активности и изоферментном составе β-1,3-глюканазы и хитиназы в норме. Для 8 отобранных сортов установлены особенности поведения ферментов в ответ на заражение F. graminearum. На изоферментном уровне у всех сортов строго прослеживалась активация щелочного компонента ГС β-1,3-глюканазы с pI 9.0 и индукция или усиление кислых изоферментов с ХС хитиназы с pI 4.6 и 5.1.

Зерттеу нәтижесінде бидай өскіндерінің тазартылған хитинмен байланысатын (ХБ) хитиназа және β-глюканмен байланысатын (ГБ) β-1,3-глюканазасы алынып, олардың физико-химиялық қасиеттері анықталды. ХБ хитиназа изоферменттерінің pI спектрі 4,3-9,0 болды, молекулалық салмақтары 28, 33 және 35 кДа сәйкес келді. ГБ β-1,3-глюканазаға pI 5,0-9,3 изоформалары кірді. Екі ферменттің қолайлы рН-5,0-5,5, ал температурасы 30-40°C болды. Екі фермент те 60°C қыздыруда 10 минут белсенділігін сақтады. Ферменттердің нақты белсенділігі, олардың тамырлары, сабақтары, жапырақтарындағы ИЭФ гетерогенділігі дәніне қарағанда жоғары болды. Бидай өскіндерінің β-1,3-глюканазасы мен хитиназасына ең үлкен белсендіргіш әсерді саңырауқұлақтың 6 апталық дақылдық сүзгісі (ДС), ең азын-2 апталық ДС көрсетті. 4 және 6 апталық ДС ферментті өтпелі 2 фазалық белсендіргіш әсерімен сипатталды. Хитозанолигоқант аз мөлшерде (0,01 мг/мл) өскіндерде β-1,3-глюканаза және хитиназаны қатты индукциялады. Ламинарин ферменттер белсенділігіне тұрақты әсер етті. Бидайдың 26 сортының қалыпты жағдайдағы өскіндеріндегі β-1,3-глюканаза мен хитиназаның белсенділік деңгейінде және изоферменттік құрамында өзгергіштік анықталды. Таңдалған 8 сұрыптың F. graminearum зақымдауына ферменттердің жауап қайтару ерекшеліктері анықталды. Изоферменттік деңгейде барлық сұрыптарда ГБ β-1,3-глюканазаның сілті компонентінің белсенділігі рI 9.0 және ХБ хитиназаның қышқыл рI 4.6 және 5.1 изоферменттерінің индукциясы немесе күшеюі қатаң бақыланды.

В проведенном исследовании получены новые данные по биохимическим свойствам β-1,3-глюканазы и хитиназы у важной зерновой культуры пшеницы, идентификации и ответных защитных реакциях отдельных изоформ на заражение широко распространенным патогеном F. graminearum. Эти белки могут быть использованы в качестве биохимических маркеров для тестирования сортов пшеницы на устойчивость к грибным патогенам.

Зерттеуде бидайдың маңызды дақылында β-1,3-глюканаза мен хитиназаның биохимиялық қасиеттері, жеке изоформалардың F. graminearum кең таралған патогенімен жұқтыруға сәйкестендіру және қорғаныс реакциялары бойынша жаңа деректер алынды. Бұл ақуыздарды бидай сорттарын саңырауқұлақ қоздырғыштарына төзімділігін тексеру үшін биохимиялық маркер ретінде пайдалануға болады.

Биотехнология, селекция зерновых культур.

Биотехнология, астық тұқымдастылар селекциясы.

UDC indices
581.19.633.1; 581.19.635.21
International classifier codes
34.31.35; 68.35.29; 34.31.27;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
ПШЕНИЦА; ПРОРОСТКИ; ХИТИНАЗА; β-1,3-ГЛЮКАНАЗА; ИЗОФЕРМЕНТЫ; КУЛЬТУРАЛЬНЫЙ ФИЛЬТРАТ; ЭЛИСИТОРЫ; FUSARIUM GRAMINEARUM;
Key words in Kazakh
БИДАЙ; ӨСКІНДЕР; ХИТИНАЗА; β-1,3-ГЛЮКАНАЗА; ИЗОФЕРМЕНТТЕР; ДАҚЫЛДЫҚ СҮЗГІ; ЭЛИСИТОРЛАР; FUSARIUM GRAMINЕARUM;
Head of the organization Шарипов Камалидин Орынбаевич Доктор биологических наук / Профессор
Head of work Хакимжанов Айдар Атымтаевич Кандидат биологических наук / нет
Native executive in charge Кузовлев Владимир Анатольевич нет