The object of research, development or design (in Russian) : Объектом исследования являются рекомбинантные белки AtPARP1 и AtPARP2 Arabidopsis thaliana.

The object of research, development or design (in Kazakh) : Зерттеу нысаны: Arabidopsis thaliana өсімдігінің рекомбинантты AtPARP1 және AtPARP2 ақуыздары.

Aim of work (in Russian) : Цель работы: Выделение и характеристика кДНК генов Поли-АДФ-рибоза полимераз Arabidopsis thaliana (PARP1, PARP2) и детальное изучение субстратной специфичности рекомбинантных ферментов. А также изучение роли Поли-АДФ-рибоза полимераз A. thaliana в ковалентной модификации разрывов цепей ДНК in vitro и in vivo.

Aim of work (in Kazakh) : Жобаның мақсаты Arabidopsis thaliana Поли-АДФ-рибоза полимеразаларының (PARP1, PARP2) кДНҚ гендерін бөліп алу және сипаттау, рекомбинантты ферменттердің субстраттық арнайылылығын зерттеу және де Поли-АДФ-рибоза полимеразаларының ДНҚ тізбегі үзілістерінің соңдарын ковалентті модификациялаудағы рөлін in vitro және in vivo жағдайында зерттеу болып табылады.

Методы исследования (на русском) : Методы исследования: Экспрессия белков; Выделение и клонирование генов кДНК; Аффинная хроматография; Анализ активности ферментов; MALDI-TOF масс-спектрометрия; Вестерн-блоттинг; Дот блоттинг.

Методы исследования (на казахском) : Әдістемелер: Ферменттер экспрессиясы, кДНҚ гендерін оқшаулау және клондау; Ферменттердің белсенділігін талдау; Иммуноблотинг; Аффинндік хроматография; MALDI-TOF масс-спектрометрия; Вестерн-блоттинг; Дот блоттинг.

Obtained results and novelty (in Russian) : Результаты: Показано, что, растительные белки atPARP1 и atPARP2 как и их аналоги из млекопитающих АДФ-рибозилируют 5'-концевые фосфатные остатки в дуплексных олигонуклеотидах ДНК и плазмиде, содержащей по крайней мере два близко расположенных разрыва цепи ДНК. AtPARP1 предпочтительно катализирует ковалентное присоединение звеньев АДФ-рибозы к концам дуплексов ДНК с рецесстом, содержащих либо 3'-кордицепин, либо 5'-фосфат. Тогда как atPARP2 предпочтительно АДФ-рибозилирует дуплексы ДНК с ником и гэпом, содержащие концевой 5'-фосфат. PARP катализируемая ДНК АДФ-рибозилирование особенно чувствительно к расстоянию, которое разделяет разрывы двух цепей в одной и той же молекуле ДНК, 1,5 и 1 или 2 витка спирали для atPARP1 и atPARP2, соответственно. PAR гликогидролаза (PARG) восстанавливает нативную структуру ДНК путем гидролиза аддуктов PAR-ДНК, генерируемых atPARP. Биохимический и масс-спектрометрический анализ аддуктов PAR-ДНК показал, что atPARP используют фосфорилированные концы ДНК в качестве альтернативы белковым акцепторным остаткам для катализа синтеза цепи PAR через образование фосфодиэфирной связи между C1'АДФ-рибозы и фосфатным остатком концевого нуклеотида в фрагменте ДНК. Взятые вместе, эти данные устанавливают присутствие нового типа ДНК-модифицирующей активности в PARP арабидопсиса, предполагая возможную роль АДФ-рибозилирования ДНК в передаче сигналов повреждения ДНК и восстановлении наземных растений.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Алынғын нәтижелер: Өсімдіктер ақуыздары atPARP1 және atPARP2-де, олардың сүтқоректілердегі аналогтары сияқты, дуплексті ДНҚ олигонуклеотидтеріндегі және кем дегенде екі жақын орналасқан ДНҚ тізбегіның үзілісі бар плазмидада 5'-соңдық фосфат қалдықтарын AДФ-рибозильдейтіні көрсетілген. AtPARP1 жақсырақ ADP-рибоза бірліктерінің құрамында 3'-кордицепин немесе 5'-фосфаты бар рецестті ДНҚ дуплекстерінің ұштарына ковалентті қосылуын катализдейді. AtPARP2 өз кезегінде құрамында 5'-соңдық фосфаты бар ник пен гэпті ДНҚ дуплекстерін ADP-рибозильдейді. PARP-катализденген ДНҚ АДФ-рибозильденуі бір ДНҚ молекуласындағы екі тізбек үзілістерін бөлетін қашықтыққа ерекше сезімтал, сәйкесінше ол atPARP1 үшін 1,5 және atPARP2 үшін 1 немесе 2 спираль бұрылыстарын құрайды. PAR гликогидролаза (PARG) atPARP арқылы түзілген PAR-ДНҚ қосымшаларын гидролиздеу арқылы ДНҚ нативті құрылымын қалпына келтіреді. PAR-ДНҚ қосылыстарын биохимиялық және масс-спектрометриялық талдау көрсеткендей, atPARP фосфорланған ДНҚ ұштарын ақуыз акцепторының қалдықтарына балама ретінде C1'ADP-рибоза мен ДНҚ фрагментіндегі терминальды нуклеотидтің фосфат қалдығы арасындағы фосфодиэфир байланысы арқылы PAR тізбегінің синтезін катализдеу үшін қолданады. Бұл деректер Арабидопсистің PARP-ында ДНҚ-модификациялық белсенділіктің жаңа түрінің болуын анықтайды. Сонымен қатар, ДНҚ-ның зақымдануы туралы сигнал беруде және жердегі өсімдіктерде ДНҚ репарациясында АДФ-рибозильдеудің мүмкін рөлін көрсетеді.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : нет

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : нет

Level of implementation (in Russian) :

Level of implementation (in Kazakh) :

Efficiency (in Russian) :

Efficiency (in Kazakh) :

Field of application (in Russian) : Молекулярная биология и биотехнология

Field of application (in Kazakh) : Молекулалық биология және биотехнология