Inventory number IRN Number of state registration
0220РК00409 AP05133746-OT-20 0118РК01198
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 3
International publications: 2 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 2
Number of books Appendicies Sources
1 5 61
Total number of pages Patents Illustrations
136 0 30
Amount of funding Code of the program Table
12000000 AP05133746 5
Code of the program's task under which the job is done
Г. 2018
Name of work
Конструирование рекомбинантных каприпоксвирусов, экспрессирующих протективные антигены Brucella spp., и изучение их иммунобиологических свойств
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied Метод, способ
Report authors
Червякова Ольга Викторовна , Тайлакова Эльмира Талгатовна , Султанкулова Куляйсан Турлыбаевна , Зинина Надежда Николаевна , Строчков Виталий Михайлович , Садикалиева Сандугаш Оразбековна , Шыныбекова Гаухар Орынбековна , Исабек Айша Уранқызы , Сармыкова Махпал Кенжеевна , Абубакирова Айгерим Калиевна ,
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МЗ РК
Full name of the service recipient
"Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности"
Abbreviated name of the service recipient "НИИПББ"
Abstract

Объектом исследований является вирус оспы овец Capripoxvirus.

Зерттеу насаны қой шешегі вирусы Capripoxvirus.

Цель работы – конструирование рекомбинантных вирусов оспы овец, экспрессирующих протективные антигены Brucella spp., и изучение их иммунобиологических свойств

Жұмыстың мақсаты Вrucella spp. протективті антигендерді экспрессиялайтын қой шешегі вирусының рекомбинантты штаммддарын құрастыру және олардың иммунобиологиялық қасиеттерін зерттеу болып табылады.

Для рекомбинации генома каприпоксвируса был использован метод гомологичной рекомбинации. Отбор рекомбинантных вирусов осуществляли в условиях временной доминантной селекции.

Каприпоксвирус геномын рекомбинациялау үшін гомологиялық рекомбинация әдісі қолданылды. Рекомбинантты вирустар уақытша доминантты селекция жағдайында таңдалынып алынды.

В результате исследований сконструированы семь плазмид интеграции pIN-TK-omp16, pIN-TK-omp19, pIN-TK-omp25, pIN-TK-SOD, pIN-TK-L7/L12, pIN-TK-IalB, и pIN-TK-omp19&SOD для встраивания в геном вируса оспы овец шести генов, кодирующих антигенные белки Brucella spp. На все конструкции составлены паспорта. Получено семь рекомбинантных вирусов оспы овец rSPPV(TK-)L7/L12, rSPPV(TK-)omp16, rSPPV(TK-)omp19, rSPPV(TK-)omp25, rSPPV(TK-)IalB, rSPPV(TK-)sodС, rSPPV(TK-)omp19/sodC, в геном которых встроены гены, кодирующие белки Brucella spp. Все рекомбинанты за исключением rSPPV(TK-)L7/L12 оставались генетически стабильными при длительном пассировании в культуре клеток и эффективно экспрессировали встроенные гены как в пермиссивных так и в непермиссивных клетках. Иммунизация мышей рекомбинантными вирусами индуцирует как гуморальный, так и клеточный иммунный ответ. Уровень выработки антител зависел от используемого антигена и усиливался при использовании гетерологичной прайм-бустер иммунизации. Стимуляция спленоцитов иммунизированных мышей антигенами бруцелл приводила к синтезу интерферона-гамма. Иммунизация мышей рекомбинантными вирусами обеспечивала существенное снижение обсеменённости селезенки после контрольного заражения вирулентным штаммом 544 B. abortus, сопоставимое с вакцинным штаммом S19 B. abortus.

Зерттеулер нәтижесінде Brucella spp антигенді белоктарын кодтайтын алты генді қой шешегі вирусының геномына ендіру үшін жеті интеграция плазмидалары pIN-TK-omp16, pIN-TK-omp19, pIN-TK-omp25, pIN-TK-SOD, pIN-TK-L7/L12, pIN-TK-IalB, pIN-TK-omp19&SOD конструирленіп алынды. Барлық конструкцияларға төлқұжат жасалынды. Геномдарына Brucella spp. белоктарын кодтайтын гендер ендірілген жеті қой шешегінің рекомбинантты вирустары rSPPV(TK-)omp16 rSPPV(TK-)omp19, rSPPV(TK-)omp25, rSPPV(TK-)SOD, rSPPV(TK-)L7/L12, rSPPV(TK-)IalB, rSPPV(TK-)omp19&SOD алынды. rSPPV(TK-)L7/L12 вирусынан басқа барлық рекомбинанттар жасуша өсіндісінде ұзақ уақыт бойы жасалынған пассаждар нәтижесінде генетикалық тұрғыдан тұрақты болып қала берді. Сонымен қатар олар пермессивті жәнеде пермессивті емес жасушаларда енгізілген гендерді тиімді түрде экспрессиялады. Рекомбинантты вирустармен тышқандарды егу гуморалды және жасушалы иммунды жауапты индуцирлейді. Антиденелердің генерациясының деңгейі қолданылған антигенге байланысты болды, және гетерологиялық прйм-бустер егуді қолдану кезінде ол деңгей жоғарылады. Бруцелла антигендерімен егілген тышқандардың спленоциттерін ынталандыру интерферн-гамманың синтезіне тудырды. Рекомбинантты вирустармен тышқандарды егу оларды B.abortus 544 вирулентті штаммымен бақылаулы түрде егуден кейін олардың көк бауырларының ластануы айтарлықтай B.abortus S19 вакциналық штаммымен тепе-тең келетіндей төменделінгені байқалынды.

Значимость работы – рекомбинантные каприпоксвирусы, экспрессирующие антигенные белки бруцелл являются перспективными кандидатами для разработки безопасной вакцины против бруцеллёза.

Жұмыстың маңыздылығы – бруцелланын антигенді белоктарын экспрессиялайтын рекомбинантты каприпоксвирустар, бруцеллезге қарсы қауіпсіз екпені жасаудағы перспективалы кандидаттар болып табылады.

Область применения – медицинская/ветеринарная вирусология.

Қолдану аймағы – медициналық/веетринарлық биология.

UDC indices
619:615.375:578.821:578.56
International classifier codes
62.37.35; 34.25.23;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
Brucella spp.; протективные белки; векторные вакцины; вирус оспы овец; противовирусный иммунитет;
Key words in Kazakh
Brucella spp.; протективті белоктар; векторлы вакциналар; қой шешегі вирусы; вирусқа қарсы иммунитет;
Head of the organization Закарья Кунсулу Дальтоновна Доктор биологических наук /
Head of work Червякова Ольга Викторовна Кандидат биологических наук / профессор
Native executive in charge Тайлакова Эльмира Талгатовна Магистр биологии