The object of research, development or design (in Russian) : CCL5 5p12 5m, штаммы S. aureus

The object of research, development or design (in Kazakh) : CCL5 5p12 5m, S. aureus штаммдары

Aim of work (in Russian) : Провести комплекс экспериментов доказывающих состоятельность использования новых терапевтических подходов в лечении инфекций вызванных S. aureus

Aim of work (in Kazakh) : S. aureus тудырған инфекцияларды емдеуде жаңа терапиялық тәсілдерді қолданудың дәлелділігін тексеру эксперименттер жиынтығын өткізу.

Методы исследования (на русском) : Выделение и культивирование лимфоцитов периферической крови проводили стандартными методами. Ген LukE был клонирован в плазмидный вектор pET28-c(+) по сайтам EcoRI и Not с последующей трансформацией клеток E.coli. Последующее секвенирование показало гомологию клонированных последовательностей с генами LukE-GFP. Наработку и очистку белка проводили с использованием аффинной хроматографии на колонках Ni-NTA. Для совместного культивирования Т-культур клеток и штаммов S.aureus был выбран протокол F. Alonzo, 2012. Эксперименты по проточной цитометрии проводились на цитометре Beckman Coulter. Данные были проанализированы с помощью программного обеспечения Summit 6.2 Software. Анализ ммунофлюоресцентной микроскопии проводили на микроскопоме EVOS FL Auto2 (ThermoFisher)

Методы исследования (на казахском) : Перифериялық қанның лимфоциттерін бөліп алу және өсіру стандартты әдістерімен асырылды. EcoRI және Not учаскелерінде LukE гені pET28-c (+) плазмидалық векторына клондалды, содан кейін E. coli-ге трансформацияланды. Кейінгі секвенирлеу LukE-GFP гендерімен клондалған тізбектің гомологиясын көрсетті. Ақуыздарды өндіру және тазарту Ni-NTA бағандарында аффиндік хроматографияны қолдану арқылы жүргізілді. T-дақылдарының жасушалар мен S. aureus штамдарының бірге өсіру үшін F. Alonzo, 2012 жылғы зерттеуі таңдалды. Ағындық цитометрия эксперименттер Beckman Coulter цитометрінде жасалды.Деректер Summit 6.2 Software көмегімен талданды. Иммунофлуоресценттік микроскопияны талдауы EVOS FL Auto 2 (ThermoFisher) микроскопында жүргізілді

Obtained results and novelty (in Russian) : Предварительно собранная конструкция была использована для проведения выделения и очистки белка LukE; проведен рекрутмент здоровых пациентов (доноров) и забор крови для выделения и культивирования Т-лимфоцитов; Т-лимфоциты, были использованы для предварительного анализа взаимодействия с белком LukE. Клетки заморожены для последующих экспериментов и храняться при -80 С. Были приобретены штаммы Staphylococcus aureus, продуцирующие токсин. Проведены эксперименты по подбору оптимальных условий для совместного культивирования клеточных линий и штаммов стафилококка. Оценена способность ингибирования взаимодействия рекомбинантного белка LukE с CCR5 белком CCL5 5p12 5m

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Алдын ала жиналған құрылым LukE ақуызын бөліп алу және тазалау үшін пайдаланылды; сау пациенттер (донорлар) іріктеу жүргізіліп және т-лимфоциттерді өсіру және бөліп алу үшін қан алынды; Т-лимфоциттер LukE ақуызымен қарым-қатынасы алдын-ала талдау үшін пайдаланылды. Жасушалар келешек эксперименттерге мұздатылып, - 80 С температурада сақталуда. Т-лимфоциттер мен стафилококк дақылын бірлесіп өсіру үшін оңтайлы жағдайларды іріктеу бойынша эксперименттер жүргізілді. Staphylococcus aureus токсин шығаратын штамдары сатып алынды.Жасуша дақылдары мен стафилококк штамдарын бірлесіп өсірудің оңтайлы жағдайларын таңдау бойынша эксперименттер жүргізілді. Рекомбинантты LukE ақуызының CCR5 ақуызымен CCL5 5p12 5m өзара әрекеттесуін бәсеңдеуі қабілеті бағаланды

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : НИР фундаментальная

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Іргелі ҒЗЖ

Level of implementation (in Russian) : Не внедрено

Level of implementation (in Kazakh) : Енгізілмеген

Efficiency (in Russian) : Полученные результаты исследований дают понимание новых механизмов антимикробной терапии

Efficiency (in Kazakh) : Алынған зерттеу нәтижелері микробқа қарсы терапияның жаңа механизмдері туралы түсінік береді.

Field of application (in Russian) : Биотехнология и медицина

Field of application (in Kazakh) : Биотехнология және медицина