| Inventory number | IRN | Number of state registration |
|---|---|---|
| 0225РК01217 | AP19676655-OT-25 | 0123РК00229 |
| Document type | Terms of distribution | Availability of implementation |
| Заключительный | Gratis | Number of implementation: 0 Not implemented |
| Publications | ||
| Native publications: 2 | ||
| International publications: 0 | Publications Web of science: 0 | Publications Scopus: 0 |
| Number of books | Appendicies | Sources |
| 1 | 2 | 80 |
| Total number of pages | Patents | Illustrations |
| 71 | 3 | 21 |
| Amount of funding | Code of the program | Table |
| 35770860 | AP19676655 | 11 |
| Name of work | ||
| Разработка клонирующих векторов для получения модифицированных антигенов при диагностике бруцеллеза животных в РА, РСК, РБП и ИФА | ||
| Report title | ||
| Type of work | Source of funding | The product offerred for implementation |
| Applied | Метод, способ | |
| Report authors | ||
| Сансызбай Абылай Рысбайұлы , Шанбаев Бакдаулет Унербекович , Мендыбаева Анара Муратовна , Турсынбаев Нұртас Сәбитжанұлы , Кудайбергенова Камшат Нуржановна , | ||
|
0
0
0
0
|
||
| Customer | МНВО РК | |
| Information on the executing organization | ||
| Short name of the ministry (establishment) | Нет | |
| Full name of the service recipient | ||
| Товарищество с ограниченной ответственностью "Научно-производственное предприятие "Антиген" | ||
| Abbreviated name of the service recipient | ТОО "Научно-производственное предприятие "Антиген" | |
| Abstract | ||
|
Объектом исследования являются рекомбинантные штаммы Bacillus subtilis, экспрессирующие модифицированные антигены Omp2b возбудителей Brucella abortus и Brucella ovis, предназначенные для использования в диагностике бруцеллёза животных. Также объектом разработки выступает технология получения, культивирования и очистки данных антигенов для дальнейшего включения их в состав диагностических тест-систем. Зерттеу нысаны - жануарлардың бруцеллезін диагностикалауда қолдануға арналған Brucella abortus және Brucella ovis модификацияланған Omp2b антигендерін экспрессиялайтын рекомбинантты Bacillus subtilis штамдары. Әзірлеме сонымен қатар осы антигендерді кейіннен диагностикалық тест жүйелеріне енгізу үшін алу, өсіру және тазарту технологиясын қамтиды. Целью работы является создание биотехнологической платформы для получения безопасных, стандартизированных и высокоэффективных диагностических антигенов против возбудителей бруцеллёза животных с использованием рекомбинантных штаммов B. subtilis и оптимизация условий их культивирования на основе математического моделирования. Зерттеудің мақсаты - рекомбинантты B. subtilis штамдарын қолдана отырып, жануарлардың бруцеллез қоздырғыштарына қарсы қауіпсіз, стандартталған және жоғары тиімді диагностикалық антигендерді өндіруге арналған биотехнологиялық платформа құру және оларды математикалық модельдеуді қолдана отырып өсіру жағдайларын оңтайландыру. В исследовании применялись методы молекулярной биологии (дизайн и синтез генов, клонирование, трансформация, экспрессия), микробиологические и биотехнологические методы культивирования в стационарных и глубинных условиях, биоинформационный анализ, а также серологические методы диагностики (РА, РСК, РБП, ИФА). Для анализа кинетики роста и накопления антигенов использованы модели Моно и логистического роста. Зерттеуде молекулалық биология әдістері (гендік дизайн және синтез, клондау, трансформация және экспрессия), стационарлық және су асты жағдайларында өсірудің микробиологиялық және биотехнологиялық әдістері, биоинформатикалық талдау және серологиялық диагностикалық әдістер (RA, CSC, RBP және ELISA) қолданылды. Өсу кинетикасын және антиген жинақталуын талдау үшін монодты және логистикалық өсу модельдері пайдаланылды. Разработаны и охарактеризованы новые экспрессионные конструкции pET22/BaS19, pET22/BaS99 и pET22/Bo198, обеспечивающие синтез модифицированных антигенов в B. subtilis. Определены оптимальные параметры глубинного культивирования, повышающие продуктивность и растворимость целевых белков. Математические модели позволили количественно описать процессы роста и синтеза антигенов, что является новым подходом к управлению биотехнологическим процессом на стадии лабораторного и производственного культивирования. Жаңа экспрессиялық конструкциялар, pET22/BaS19, pET22/BaS99 және pET22/Bo198, әзірленіп, сипатталды. Бұл конструкциялар B. subtilis-те модификацияланған антигендерді синтездеуге мүмкіндік береді. Мақсатты ақуыздардың өнімділігі мен ерігіштігін арттыру үшін оңтайлы су астындағы өсіру параметрлері анықталды. Математикалық модельдер өсу мен антиген синтезі процестерінің сандық сипаттамасына мүмкіндік берді, бұл зертханалық және өнеркәсіптік өсіру кезеңдерінде биотехнологиялық процесті басқарудың жаңа тәсілін білдіреді. Негізгі жобалау және техникалық және экономикалық көрсеткіштер Разработанная технология обеспечивает получение до 4–5×10⁶ кл/см³ биомассы с высокой степенью экспрессии антигенов при оптимальных параметрах культивирования (25 °С, 0,2 мМ IPTG, pH 8,0→6,0, DO 25 %). Производственная серия обеспечивает выход антигена с диагностической активностью до 97 % при снижении себестоимости на 20–25 % по сравнению с традиционными методами выделения антигенов из патогенных культур. Әзірленген технология оңтайлы өсіру параметрлері кезінде (25°C, 0,2 мМ IPTG, рН 8,0→6,0, DO 25%) антиген экспрессиясының жоғары дәрежесімен 4–5×10⁶ жасуша/см³ биомасса өндіруге мүмкіндік береді. Өндірістік сериялар патогендік дақылдардан антигендерді бөліп алудың дәстүрлі әдістерімен салыстырғанда құнын 20–25%-ға төмендете отырып, диагностикалық белсенділігі 97%-ға дейін антиген өнімділігін қамтамасыз етеді. Результаты работы прошли лабораторные и производственные испытания на базе ТОО «НПП Антиген» и показали полное соответствие нормативным требованиям. На основании данных исследований разработана и утверждена нормативно-техническая документация СТ ТОО 980340000548–053-2025, что подтверждает готовность технологии к промышленному внедрению. Жұмыс нәтижелері NPP Antigen LLC компаниясында зертханалық және өнеркәсіптік сынақтардан өтті және нормативтік талаптарға толық сәйкестігін көрсетті. Осы зерттеулер негізінде ST TOO 980340000548–053-2025 нормативтік-техникалық құжаттамасы әзірленіп, бекітілді, бұл технологияның өнеркәсіптік енгізуге дайындығын растайды. Применение рекомбинантных антигенов позволило повысить чувствительность и специфичность серологических тестов на 5–10 %, улучшить воспроизводимость результатов и обеспечить стабильность продукции при хранении. Использование безопасных штаммов B. subtilis снижает затраты на биобезопасность и повышает производительность процесса, что делает технологию экономически выгодной и экологически безопасной. Рекомбинантты антигендерді қолдану серологиялық сынақтардың сезімталдығы мен ерекшелігін 5–10%-ға арттырды, нәтижелердің қайталануын жақсартты және сақтау кезінде өнімнің тұрақтылығын қамтамасыз етті. Қауіпсіз B. subtilis штамдарын пайдалану биоқауіпсіздік шығындарын азайтады және процестің өнімділігін арттырады, бұл технологияны үнемді және экологиялық таза етеді. Разработанные модифицированные антигены и технология их получения предназначены для применения в ветеринарной диагностике бруцеллёза животных в составе наборов для реакций агглютинации, связывания комплемента, бенгальской пробы и иммуноферментного анализа. Технология может быть адаптирована для разработки аналогичных диагностических средств против других зоонозных инфекций и использована в образовательных и исследовательских биотехнологических центрах. Әзірленген модификацияланған антигендер және оларды өндіру технологиясы жануарлардың бруцеллезін ветеринарлық диагностикалауда агглютинация, комплемент бекіту, Бенгал сынағы және ферментпен байланысты иммуносорбенттік талдау (ELISA) сынақтарының бөлігі ретінде қолдануға арналған. Технологияны басқа зоонозды инфекцияларға қарсы ұқсас диагностиканы әзірлеуге бейімдеуге және білім беру және зерттеу биотехнологиялық орталықтарында қолдануға болады. |
||
| UDC indices | ||
| 579.841.93; 60; 57.083 | ||
| International classifier codes | ||
| 68.41.00; 68.41.35; 68.41.41; 68.41.63; | ||
| Readiness of the development for implementation | ||
| Key words in Russian | ||
| Бруцеллез животных; диагностика; рекомбинантные технологии; микробиология; биотехнология; тест-система; | ||
| Key words in Kazakh | ||
| Жануарлардың бруцеллезі; диагностика; рекомбинантты технологиялар; микробиология; биотехнология; тест жүйесі; | ||
| Head of the organization | Ахметсадыков Нурлан Нуролдинович | Доктор ветеринарных наук / профессор |
| Head of work | Сансызбай Абылай Рысбайұлы | Доктор ветеринарных наук / профессор |
| Native executive in charge | ||