The object of research, development or design (in Russian) : Объект исследования — сельскохозяйственные животные, патологический материал, полученный от больных и подозреваемых в заболевании животных, возбудитель эмкара (Clostridium chauvoei) и серологические методы для его выявления (реакция латекс-агглютинации — РЛА).

The object of research, development or design (in Kazakh) : Зерттеу нысаны-ауылшаруашылық жануарлары, ауру және күдікті жануарлардан алынған патологиялық материал, қарасан қоздырғышы (Clostridium chauvoei) және оны анықтаудың серологиялық әдістері (латекс-агглютинация — РЛА реакциясы).

Aim of work (in Russian) : Цель исследования — конструирование антигенного и антительного эмкарного диагностикума и лабораторные опыты по испытанию диагностической ценности разработанного теста.

Aim of work (in Kazakh) : Зерттеудің мақсаты-антигендік және антиденелік эмкарлық диагностикумды жобалау және әзірленген сынақтың диагностикалық құндылығын сынау бойынша зертханалық тәжірибелер.

Методы исследования (на русском) : Для конструривания эмкарного антигенного диагностикума использовали культуру Clostridium chauvoei выращивали на среде Кит-Тароции при 37 °C 18–24 ч. инактивацию культуры проводили 0,4 % формалином при 37 °C 24 ч, дважды промывывали PBS (5 000 g, 10 мин), ресуспендировали в минимальном объёме PBS, подвергали ультразвуковой дезинтеграции 3 раза по 10 минут. Затем центрифугировали 10 000g × 20 мин., осадок удалили, супернатант использовали как антиген. Очистку антигена проводили фильтрацией через бактериальные фильтры - 0,22 µm. Далее проводили иммобилизацию антигена (конц.0,5–1 мг/мл белка) на латексные микросферы (0,8–1 мкм) путем инкубирования 2 ч при комнатной температуре. Для получения гипериммунной противоэмкарной сыворотки были отработаны три схемы иммунизации: 1-эмкарный антиген (без модулятора), 2-эмкарный антиген + иммуномодулятор, 3-эмкарный антиген, через 24 ч +иммунмодулятор. Инъекции проводили внутримышечно. Определение активности сывороток проводили в реакция агглютинации (РА) с эмкарным антигеном. Для конструривания антительного диагностикума на поверхности 4%-ной суспензии латексных микросфер размером 0,8-1,0 мкм в обьеме 1 мл адсорбировали 1 мл раствора иммуноглобулинов из гипериммунных противоэмкарных сывороток крови в глицин-солевом буфере и инкубировали 2 ч при 37º,.затем в течении 8 ч при 4ºС в холодильнике.

Методы исследования (на казахском) : Эмкарлық антигендік диагностикумды жобалау үшін Clostridium chauvoei дақылы 37 °C 18-24 сағатта Кит-Тароция ортасында өсірілді, өсіндіні инактивациялау 37 C 24 сағатта 0,4% формалинмен жүргізілді, PBS екі рет жуылды (5 000 g, 10 мин), PBS минималды көлемінде қайта суспензияланды, 10 минуттан 3 рет ультрадыбыстық дезинтеграция жасалынды. Содан кейін 10 000g × 20 мин центрифугаланды, тұнба алынып тасталды, супернатант антиген ретінде қолданылды. Антигенді тазарту 0,22 мм бактериялық сүзгілер арқылы сүзу арқылы жүзеге асырылды. Әрі қарай бөлме температурасында латекс микросфераларын (0,8–1 мкм) 2 сағат инкубациялау арқылы антигенді ( 0,5-1 мг/мл ақуыз ) иммобилизациялау жүргізілді. Гипериммунды қарасанға қарсы сарысуды алу үшін үш иммундеу режимі жасалды: 1-эмбрионды антиген (модуляторсыз), 2-эмбрионды антиген + иммуномодулятор, 3-эмбрионды антиген, 24 сағаттан кейін +иммунмодулятор. Инъекциялар бұлшықет ішіне енгізілді. Сарысулардың белсенділігін анықтау эмкарлық антигенмен агглютинация реакциясында (РА) жүргізілді. Көлемі 0,8-1,0 мкм болатын латекс микросфераларының 4% суспензиясынының глицин-тұз буферінде 1 мл көлеміне антидене диагностикасын жасау үшін гипериммунды қарасанға қарсы қан сарысуларының 1 мл иммуноглобулин ерітіндісін адсорбциялап, 37º температурада 2 сағат инкубациялайды. содан кейін тоңазытқышта 4ºС 8 сағат ұстайды.

Obtained results and novelty (in Russian) : В ходе исследования были выделены и очищены культуры C. chauvoei, а также разработан антигенный диагностикум, используемый в реакции латекс-агглютинации (РЛА). Готовый антиген апробировали в лабораторных условиях при определении поствакцинальных антител у вакцинированных животных. Результаты исследовании показали пригодность РЛА для выявления поствакцинальных антител при эмкаре КРС. При испытании различных схем иммунизации доноров для получения гипериммунной противоэмкарной сыворотки оптимальным признана схема, где антиген вводился совместно с модулятором (титр антител 1:320). При раздельном введении антигена и модулятора титр антител составил 1:240, при использовании одного эмкарного антигена 1:160 (контроль). Определение активности сывороток проводили в реакция агглютинации (РА) с эмкарным антигеном. Введение эмкарного антигена вызывало формирование специфического иммунного ответа начиная с 14-х суток после первой иммунизации, максимальные титры отмечены на 21–28 сутки. В результате выполнения работы получен патент (на полезную модель) №10554 от Казахстанского патентного ведомства по теме «Способ получения латексного диагностикума для диагностики эмфизематозного карбункула». По результатам исследования была также опубликована 1 статья в журнале Frontiers in Veterinary Science, индексируемом в базе данных Web of Science с импакт-фактором и квантилем Q1 (94-й процентиль).

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Зерттеу барысында C. chauvoei оқшауланып, тазартылды, сонымен қатар латекс-агглютинация (РЛА) реакциясында қолданылатын антигендік диагностикум жасалды. Дайын антиген вакцинацияланған жануарларда вакцинациядан кейінгі антиденелерді анықтау кезінде зертханалық жағдайда сыналды. Зерттеу нәтижелері ІҚМ эмкары кезінде вакцинациядан кейінгі антиденелерді анықтау үшін РЛА жарамдылығын көрсетті. Гипериммунды қан сарысуын алу үшін донорларды иммундаудың әртүрлі схемаларын сынау кезінде антиген модулятормен бірге енгізілген схема оңтайлы деп танылды (антиденелер титрі 1:320). Антиген мен модуляторды бөлек енгізгенде антидене титрі 1:240, бір эмкарлы антигенді қолданғанда 1:160 (бақылау) құрады. Сарысулардың белсенділігін эмкар антигенімен агглютинация реакциясы (АР) арқылы анықталды. Эмкар антигенін енгізу бірінші иммундаудан кейін 14 күннен бастап нақты иммундық жауаптың пайда болуына себеп болды, максималды титрлер 21-28 тәулікке белгіленді. Жұмысты орындау нәтижесінде "эмфизематозды карбункулды диагностикалау үшін латекс диагностикумын алу тәсілі"тақырыбы бойынша қазақстандық патенттік ведомстводан №10554 патент (пайдалы модельге) алынды. Зерттеу нәтижелері бойынша Web of Science дерекқорында импакт-фактормен және Q1 квантилімен (94-ші процентиль) индекстелген Frontiers in Veterinary Science журналында 1 мақала жарияланды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Социально-экономическое воздействие заключается в быстром и надежном выявлении больных животных, что позволяет оперативно изолировать больных животных из стада и предотвратить распространение инфекции. Разработанная технология тест-системы может быть применена в коммерческом направлении и промышленном масштабе, что создаст дополнительные рабочие места.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Әлеуметтік-экономикалық әсері ауру малды тез және сенімді анықтау арқылы ауру малды табыннан тез арада оқшаулау, бұл инфекцияның таралуын болдырмайды. Әзірленген тест-жүйесі технологиясы коммерциялық бағытта және өнеркәсіптік ауқымда өндіруге болады, бұл қосымша жұмыс орындарын құруға мүмкіндік береді.

Level of implementation (in Russian) : Были проведены лабораторные исследования для проверки диагностической значимости теста, предназначенного для выполнения на фермерских хозяйствах.

Level of implementation (in Kazakh) : Шаруа қожалықтарында пайдалануға арналған тестінің диагностикалық мәнін тексеруге арналған зертханалық тәжірибелер жүргізілді.

Efficiency (in Russian) : Практическая эффективность работы заключается в разработке нового, высокоэффективного отечественного препарата для диагностики заболеваний, вызываемых C. chauvoei. Предлагаемая технология получения и использования тест-системы доступна и проста в применении.

Efficiency (in Kazakh) : Жұмыстың практикалық тиімділігі C.chauvoei туындататын ауруды балау үшін жаңа, жоғары тиімді отандық препаратты жасауда жатыр. Тест жүйесін алу мен пайдаланудың ұсынылып отырған технологиясы қолжетімді және енгізуге оңай.

Field of application (in Russian) : ветеринария

Field of application (in Kazakh) : ветеринария