Inventory number IRN Number of state registration
0219РК00528 BR05236307-OT-19 0118РК00938
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Промежуточный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 1
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Number of books Appendicies Sources
1 3 31
Total number of pages Patents Illustrations
52 0 10
Amount of funding Code of the program Table
30354490 О.0810 9
Code of the program's task under which the job is done
02
Name of work
Разработка экспресс тест-системы для выявления возбудителя альтернариоза в растениеводческой продукции.
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied research Коллекции
Report authors
Какимжанова Алмагуль Апсаламовна , Есимсеитова Асель Кайратовна , Айткулова Акбота Маратовна , Жаныбекова Жанаргуль Токтамысовна , Жолдыбаева Елена Витальевна ,
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Объекты – пораженные клубни картофеля и плоды томатов в условиях производственных хранилищ, вегетативные органы растений.

Зерттеу нысаны – өндірістік жағдайындағы сақтауда зақымдалған картоп түйнектері мен қызанақ жемістері; сонымен қатар картоптың вегетативті мүшелері пайдаланылды.

Основной целью реализации проекта является разработка экспресс тест-системы для выявления возбудителя альтернариоза в растениеводческой продукции.

Жобаның негізгі мақсаты өсімдік шаруашылығы өндірісінде альтернариоз қоздырғышын детекциялау үшін жылдам тест-жүйесін жасау болып табылады.

Методы – выделение грибных возбудителей из пораженных органов растений, определение фитопатогенной активности штаммов микроорганизмов, хранение микроорганизмов замораживанием при низких температурах, выделение ДНК из фитопатогенных грибов и генотипирование ITS (Internal transcribed spacer) - региона, очистка ПЦР (полимеразная цепная реакция) - продуктов (дефосфорилирование), определение прямой нуклеотидной последовательности, очистка реакционной смеси от не связавшихся компонентов.

Зерттеу әдістері – зақымданған өсімдік мүшелерінен саңырауқұлақ қоздырғыштарын оқшаулау, фитопатогенді микроағзалар штаммдарының белсенділігін анықтау, төмен температурада мұздату арқылы микроағзаларды ұзақ уақыт аралығында сақтау, фитопатогенді саңырауқұлақтардан ДНҚ оқшаулау және ITS аймағын генотиптеу, ПТР өнімін тазарту, тікелей нуклеотидтер тізбегін анықтау, реакциялық қоспаны байланыспаған компоненттерден тазарту.

Проведена молекулярно-генетическая идентификация 19 образцов, выделенных из картофеля и томатов, собранных в 2019 году. Из исследованных образцов 4 образца были идентифицированы как Alternaria alternata. 9 изолятов были идентифицированы, как грибы, принадлежащие роду Alternaria, которые составили коллекцию активных штаммов возбудителей альтернариоза для разработки ПЦР тест системы. Создана криоколлекция 94 образцов из 13 видов возбудителей болезней картофеля и томата. Подобран и оптимизирован протокол для выделения ДНК возбудителя напрямую из пораженных листьев. Данный протокол является экспресс-методом, не требующий стадию выделения и культивирования фитопатогена. Установили, что наиболее агрессивными были изоляты №4 и №10, где динамика развития болезни на 21-ые сутки на растениях томата составила 561,75 и 505,2 соответственно. На всхожесть семян томата и интенсивный рост проростков отрицательно влияла культуральная жидкость изолята №4 гриба Alternaria alternata, которая выражалась в снижении всхожести семян до 41% и энергии прорастания составило 127,1. Созданы положительные контроли для разрабатываемой ПЦР тест-системы. Образцы, которые были идентифицированы на основе определения прямой нуклеотидной последовательности фрагмента ITS-региона как Alternaria alternatа использовали для создания положительных контролей для разрабатываемой ПЦР-тест-системы.

2019 жылы жиналған картоп пен қызанақтан оқшауланған 19 сынаманың молекулалық-генетикалық сәйкестендірілуі жүргізілді. Зерттелген үлгілердің ішінен 4 үлгі Alternaria alternata ретінде анықталды. ПТР тест жүйесін құру үшін Alternaria тұқымдасына жататын 9 изолят анықталып, картоп пен қызанақ альтернариозының қоздырғыштары болып табылатын белсенді штаммдар жиынтығын құрды. Картоп пен қызанақ ауруларының қоздырғыштары 94 сынамадан тұратын 13 түріне крио-коллекциясы жасалды. ПТР шарттары таңдалып, оңтайландырылды. Патогенді ДНҚ-ны картоптың немесе қызанақтың зардап шеккен жапырақтарынан тікелей оқшаулау үшін әдіс таңдалып, оңтайландырылды. Бұл фитопатогендерді оқшаулау мен өсіруді қажет етпейтін экспресс әдіс болып табылады. Зерттеулер нәтижесінде №4 және №10 изоляттар жоғары агрессивтілікпен сипатталды, 21 күндік бақылау негізінде аурудың даму динамикасы нәтижесінде №4 және №10 изоляттар үшін сәйкесінше 561,75 және 505,2 құрды. Алынған мәліметтерге сәйкес, қызанақ тұқымдарының өнуі мен қарқынды өсуіне №4 Alternaria alternata изолятының культуралық сұйықтығы теріс әсер етті, бұл тұқым өнгіштігінің 41% -ға дейін және өну энергиясының 127,1 деңгейіне төмендетті. ITS аймағының фрагментінің тікелей нуклеотидтер тізбегін анықтау негізінде Alternaria alternata ретінде анықталған үлгілер ПТР тест жүйесіне оң бақылау жасау үшін пайдаланылды.

Положительный эффект разработки и внедрения диагностического ПЦР тест-системы заключается в снижении числа случаев развития альтернариоза при ранней диагностики.

ПТР диагностикалық тест-жүйесін жасау мен енгізудің оң әсері ерте диагноз кезінде альтернариа түрлерінің дамуын азайту болып табылады.

Не внедрено

Енгізілмеген

В отечественной практике в области сельского хозяйства, в основном, применяются диагностические системы, основанные на микробиологических и иммуноферментных методах анализа. Разработанная диагностическая ПЦР тест-система позволит повысить урожайность культур, возделываемых сельхозпроизводителями и сформировать отечественный рынок качественным и оздоровленным семенным материалом.

Отандық ауыл шаруашылығында, көбінесе микробиологиялық және ферменттік-иммундық әдістерге негізделген диагностикалық тест-жүйелері қолданылады. ПТР диагностикалық тест-жүйесі ауыл шаруашылық культураларының өнімділігін арттырады және ішкі нарыққа жоғары сапалы және пайдалы тұқымдық материалмен қамтамасыз етеді.

Сельское хозяйство

Ауыл шаруашылығы

UDC indices
57.083
International classifier codes
62.41.99; 68.03.07; 68.37.31; 62.13.63;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
Тест-система; альтернариоз; болезнь растений; разработка; продукция; защита растений;
Key words in Kazakh
Тест-жүйе; альтернариоз; өсімдік аурулары; құрастыру; өнім; өсімдіктерді қорғау;
Head of the organization Раманкулов Ерлан Мирхайдарович PhD / профессор
Head of work Какимжанова Алмагуль Апсаламовна Доктор биологических наук / доцент
Native executive in charge