The object of research, development or design (in Russian) : На 2024 год: Наняты ассистенты и заказаны реактивы. К концу года мы начнем производить K. lactis, экспрессирующий антагонист CCL5 5p7 6m. Мы также начнем оценивать влияние антагониста CCL5 на воспалительное заболевание кишечника (ВЗК) у мышей.

The object of research, development or design (in Kazakh) : 2024 жылға: ғылыми көмекшілер жалданып, реактивтерге тапсырыс берілді. Жылдың соңына қарай біз ccl5 5p7 6m экспрессиялық антагонисті K. lactis шығара бастаймыз. Біз сондай-ақ ccl5 антагонистінің тышқандардағы ішектің қабыну ауруына (IBD) әсерін бағалай бастаймыз.

Aim of work (in Russian) : Цель этого проекта - генетическая инженерия, сравнение и анализ микробиома, экспрессирующего различные противовоспалительные белки в качестве средства леченияо воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК).

Aim of work (in Kazakh) : Бұл жобаның мақсаты - генетикалық инженерия, ішектің қабыну ауруларын (IBD) емдеу құралы ретінде әртүрлі қабынуға қарсы ақуыздарды білдіретін микробиоманы салыстыру және талдау.

Методы исследования (на русском) : Для достижения поставленных целей разрабатываются различные штаммы бактерий и дрожжей, экспрессирующие антагонисты CCL5 для лечения воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК). Виды Lactobacillus и/или Kluyveromyces lactis были сконструированы для экспрессии антагониста CCL5 (5p12 5m), и в дальнейшем планируется клонировать второй антагонист (5p7 6m G32A) в K. lactis. Мыши будут разделены на группы для экспериментов с острым и хроническим IBD, где генетически модифицированные микроорганизмы будут вводиться в организм до индукции IBD с помощью декстран сульфата натрия (DSS). При острой IBD мыши будут получать 2-3% DSS в течение 6 дней, после чего их кишечник и сыворотка будут собраны для анализа. Индукция хронического IBD включает циклическое введение 1-2% DSS, чередующееся с периодами нормальной воды и непрерывного гаважа микроорганизмами. Контрольные группы будут включать мышей, которых кормили микроорганизмами дикого типа или PBS. Для анализа тканей кишечника и толстой кишки будут использованы гистология и иммуногистохимия, а для оценки воспалительной реакции будут взяты образцы сыворотки крови. Этот подход направлен на оценку терапевтического потенциала модифицированных микробиомов в лечении IBD.

Методы исследования (на казахском) : Мақсатқа жету үшін ішектің қабыну ауруларын (IBD) емдеу үшін ccl5 антагонистерін экспрессиялайтын бактериялар мен ашытқылардың әртүрлі штамдары жасалады. Lactobacillus және/немесе kluyveromyces Lactis түрлері ccl5 антагонистін (5p12 5m) экспрессиялау үшін жасалған және одан әрі K. Lactis-те екінші антагонистті (5p7 6M G32A) клондау жоспарланған. Тышқандар жедел және созылмалы IBD эксперименттері үшін топтарға бөлінеді, мұнда генетикалық түрлендірілген микроорганизмдер декстран натрий сульфаты (DSS) арқылы IBD индукциясына дейін денеге енгізіледі. Жедел IBD кезінде тышқандар 6 күн ішінде 2-3% DSS алады, содан кейін олардың ішектері мен сарысуы талдау үшін жиналады. Созылмалы IBD индукциясы қалыпты су мен микроорганизмдердің үздіксіз гаваж кезеңдерімен ауысатын 1-2% DSS циклдік енгізуді қамтиды. Бақылау топтарына жабайы типтегі микроорганизмдермен немесе PBS-пен қоректенетін тышқандар кіреді. Ішек пен тоқ ішек тіндерін талдау үшін гистология мен иммуногистохимия қолданылады, ал қабыну реакциясын бағалау үшін қан сарысуының үлгілері алынады. Бұл тәсіл IBD емдеудегі модификацияланған микробиомалардың емдік әлеуетін бағалауға бағытталған.

Obtained results and novelty (in Russian) : Была сконструирована плазмида с новым антагонистом CCL5 5p7 6m G32A и клонирована в K.lactis. Продолжается интеграция CCL5-антагониста 5p7 6m G32A в геном K.lactis. Продолжается проверка экспрессии и секреции CCL5-антагониста 5p7 6m G32A трансформированным штаммом K.lactis. В данном исследовании проводился эксперимент на мышах, которым был введен определенный микробиом в кишечник путем зондирования. В результате у подопытных животных развилось воспалительное заболевание кишечника (ВЗК). Интересно отметить, что у группы мышей, получавших терапию специальными микроорганизмами, которые экспрессировали антагонист CCL5 5p12 5m, наблюдалось значительное снижение воспалительного процесса. Эта терапия проводилась как до, так и после индукции ВЗК. Спустя семь дней у экспериментальных мышей было диагностировано острое ВЗК. Однако в группе животных, которым вводились микроорганизмы с экспрессией антагониста CCR5 5 p12 5m (до и/или после провоцирования ВЗК), воспалительные проявления были существенно менее выражены по сравнению с контрольной группой.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Жаңа CCL5 5p7 6m g32a антагонисті бар плазмида жасалды және K. lactis-ке клондалған . 5p7 6 mg 32A cl5 антагонистінің K. Lactis геномына интеграциясы жалғасуда.5p7 6 mg 32A трансформацияланған K. Lactis штаммының CCL5 антагонистінің экспрессиясы мен секрециясын тексеру жалғасуда. Бұл зерттеуде тышқандарға эксперимент жүргізілді, олар ішекке белгілі бір микробиоманы зондтау арқылы енгізді. Нәтижесінде сынақ жануарларында ішектің қабыну ауруы (ІҚА) дамыды. Бір қызығы, ccl5 5p12 5m антагонистін білдіретін арнайы микроорганизмдермен емделген тышқандар тобында қабыну процесінің айтарлықтай төмендеуі байқалды. Бұл терапия ІҚА индукциясына дейін де, кейін де жүргізілді. Жеті күннен кейін эксперименттік тышқандарға жедел ІҚА диагнозы қойылды. Алайда, ccr5 5 P12 5m антагонисті экспрессиясы бар микроорганизмдер енгізілген жануарлар тобында (ІҚА қоздырылғанға дейін және/немесе одан кейін) қабыну көріністері бақылау тобымен салыстырғанда айтарлықтай аз байқалды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Несмотря на наличие различных вариантов лечения, во многих случаях ВЗК их недостаточно. Кроме того, если нам удастся создать генетически модифицированный микробиом, снижающий воспаление при IBD, мы получим дешевый и легко вводимый препарат, который сможет помочь пациентам с ВЗК как в Казахстане, так и во всем мире.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Емдеудің әртүрлі нұсқаларына қарамастан, көптеген жағдайларда олар жеткіліксіз. Сонымен қатар, егер біз IBD кезінде қабынуды төмендететін генетикалық түрлендірілген микробиоманы жасай алсақ, біз Қазақстанда да, бүкіл әлемде де IBD бар науқастарға көмектесе алатын арзан және оңай енгізілетін препаратты аламыз

Level of implementation (in Russian) : На начальных этапах реализации.

Level of implementation (in Kazakh) : Іске асырудың бастапқы кезеңдерінде.

Efficiency (in Russian) : В связи с тем, что финансирование проекта началось совсем недавно, эффективность пока не наблюдается.

Efficiency (in Kazakh) : Жобаны қаржыландыру жақында басталғандықтан, тиімділік әлі байқалған жоқ.

Field of application (in Russian) : Естественные науки, Биологические науки, Биохимия и молекулярная биология

Field of application (in Kazakh) : Жаратылыстану ғылымдары, Биология ғылымдары, Биохимия және молекулалық биология