The object of research, development or design (in Russian) : Иммунореактивные белки Babesia bigemina

The object of research, development or design (in Kazakh) : Babesia bigemina-ның иммунореактивті ақуыздары

Aim of work (in Russian) : Целью проекта является определение и синтез иммунодоминантных антигенов Babesia bigemina и разработка на их основе ИФА тест-системы для серологической диагностики бабезиоза КРС.

Aim of work (in Kazakh) : Жобаның мақсаты Babesia bigemina иммунодоминантты антигендерін анықтау және синтездеу, сондай-ақ олардың негізінде ірі қара малдың бабезиозын серологиялық диагностикалауға арналған ИФТ тест-жүйесін әзірлеу.

Методы исследования (на русском) : При проведении исследований применялись иммунологические и молекулярно-генетические методы исследований.

Методы исследования (на казахском) : Зерттеулер барысында иммунологиялық және молекулалық-генетикалық зерттеу әдістері қолданылды.

Obtained results and novelty (in Russian) : Проведено тестирование проб коллекции ДНК, выделенной из цельной крови от 7100 голов крупного рогатого скота, с использованием универсальных праймеров подобраных на рибосомальный оперон Babesia spp и Theileria spp. Для определения видового разнообразия, проведено секвенирования фрагмента 18S rRNA гена в позитивных по результатам ПЦР пробах. Были идентифицированы два вида тейлерий: T. annulata и T. orientalis, а также три вида бабезий (B. bigemina, B. occultans, B. major). С целью определения диагностически перспективных антигенов, проведен анализ протеомов B.bigemina. Был проведен биоинформатический анализ предсказанных белков с использованием методов обратной вакцинологии (in silico). Определены стратегия и методы клонирования выбранных кандидатов (системы экспрессии, векторы, условия культивирования и очистки). Проведена амплификация/синтез de novo нуклеотидных последовательностей двух идентифицированных in silico протеинов. Проведена амплификация/синтез de novo нуклеотидных последовательностей генов диагностически перспективных протеинов B.bigemina описанных в литературе. Для получения белка AMA-1 амплифицированы участки эктодоменов I и II. Для получения антигенов RAP-1 амплифицированы участки С-концевого фрагмента.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Жалпы саны 7100 ірі қара малдың тұтас қанынан бөлінген ДНҚ коллекциясының үлгілері Babesia spp және Theileria spp рибосомдық оперонына таңдалған әмбебап праймерлерді пайдалана отырып, тестілеуден өткізілді. Түрлік алуантүрлілікті анықтау үшін ПТР нәтижесі бойынша оң үлгілерде 18S рРНҚ генінің фрагменті секвенирленді. Екі тейлерия түрі (T. annulata және T. orientalis), сондай-ақ үш бабезия түрі (B. bigemina, B. occultans, B. major) анықталды. Диагностикалық тұрғыдан перспективалы антигендерді анықтау мақсатында B. bigemina протеомдарының талдауы жүргізілді. Кері вакцинология әдістерін (in silico) қолдану арқылы болжанған ақуыздарға биоинформатикалық талдау жасалды. Таңдалған кандидаттарды клондау стратегиясы мен әдістері (экспрессия жүйелері, векторлар, өсіру және тазалау шарттары) анықталды. Екі анықталған in silico ақуыздарының нуклеотидтік тізбектерінің амплификациясы/de novo синтезі орындалды. Әдебиетте сипатталған B. bigemina ақуыздарының гендерінің нуклеотидтік тізбектерінің амплификациясы да жүргізілді. AMA-1 ақуызын алу үшін I және II эктодомендерінің жоғары иммуногендік қасиеттері бар және штамдар арасында консервативтілігі жоғары аймақтары амплификацияланды. RAP-1 антигендерін алу үшін B. bigemina-ға тән және Babesia bovis сияқты туыстас түрлермен айқаспалы реакцияларды азайтатын С фрагментінің соңғы аймақтары амплификацияланды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Проведена идентификация иммуногенных протеинов B. bigemina и определены кодирующие их гены.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : B. bigemina иммуногендік ақуыздарының идентификациясы және оларды кодтайтын гендердің анықталуы.

Level of implementation (in Russian) :

Level of implementation (in Kazakh) :

Efficiency (in Russian) : Использование иммуногенных протеинов B. bigemina позволит повысить специфичность серологических исследований

Efficiency (in Kazakh) : B. bigemina иммуногендік ақуыздарын қолдану серологиялық зерттеулердің спецификалығын арттыруға мүмкіндік береді.

Field of application (in Russian) : Ветеринария

Field of application (in Kazakh) : Ветеринария