The object of research, development or design (in Russian) : Образцы венозной крови пациентов с различными заболеваниями сердца (кардиомиопатиями, аритмиями различного генеза). Клеточные линии кардиомиоцитов.

The object of research, development or design (in Kazakh) : Әртүрлі жүрек аурулары бар науқастардан веноздық қан үлгілері (кардиомиопатиялар, әртүрлі шыққан аритмиялар). Кардиомиоцит клеткалық желісі.

Aim of work (in Russian) : Создать экспериментальную модель известной патогенной мутации гена hRYR2, связанной с первичным электрическим расстройством сердца: модель клеток кардиомиоцитов, полученных из стволовых клеток человека, и провести функциональные исследования

Aim of work (in Kazakh) : Жүректің біріншілік электрлік ауруымен байланысты hRYR2 генінің белгілі патогенді мутациясының эксперименттік моделін жасау: адамның дің жасушаларынан алынған кардиомиоцит жасушаларының үлгісін жасау және функционалдық зерттеулер жүргізу.

Методы исследования (на русском) : Молекулярно-биологические методы исследования: выделение ДНК, генотипирование, ПЦР, real-time PCR, получение и культивирование ИПСК, дифференцировка кардиомиоцитов. Электрофизиологические методы исследования.

Методы исследования (на казахском) : Молекулалық биологиялық зерттеу әдістері: ДНҚ-ны бөліп алу, генотиптеу, ПТР, нақты уақыттағы ПТР, iPSCs өндіру және өсіру, кардиомиоциттерді дифференциациялау. Электрофизиологиялық зерттеу әдістері.

Obtained results and novelty (in Russian) : Были получены линии ИПСК клеток на основе CytoTune™-iPS 2 Sendai Reprogramming Kit. При программировании был использован метод ‘feeder-free’, где вместо покрова эмбриональных клеток-фибробластов мыши используется выделенный матрикс базальной мембраны Matrigel matrix или другие альтернативы. Для поддержания уже репрограммированных клеток использовали Essential 8 Flex medium. Валидация включает в себя - проверку наличия маркера стволовых клеток (TRA-1-81), детекцию на контаминацию - заражения микоплазмой. Отработан протокол дифференцировки кардиомиоцитов, опеределены факторы роста, питательные среды и ключевые параметры для подверждения дифференцировки клеток. Для функциональной оценки патогенности генетических вариантов с неясной значимостью (VUS) был проведен сравнительный анализ членов семьи пробанда и пациентов с аналогичным заболеванием. Новый гетерозиготный несинонимичный вариант c.A13886T в RYR2 не был обнаружен. Это говорит о большей вероятности что мутации VUS (c.A13886T; p.D4629V) является патогенной.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : iPSC ұяшық сызықтары CytoTune™-iPS 2 Sendai қайта бағдарламалау жинағы негізінде алынды. Бағдарламалау кезінде тінтуірдің эмбриондық фибробласт жасушаларының қақпағының орнына оқшауланған матрицалық матрицалық немесе басқа баламалар қолданылған «фидерсіз» әдісі қолданылды. Essential 8 Flex ортасы әлдеқашан қайта бағдарламаланған ұяшықтарды ұстау үшін пайдаланылды. Валидация мыналарды қамтиды - дің жасушаларының маркерінің болуын тексеру (TRA-1-81), ластануды анықтау - микоплазмалық инфекция. Кардиомиоциттердің дифференциациясының хаттамасы әзірленді, өсу факторлары, қоректік орталар және жасушалардың дифференциациясын растайтын негізгі параметрлер анықталды. Белгісіз маңызы бар генетикалық нұсқалардың (VUS) патогенділігін функционалды бағалау үшін пробандтың отбасы мүшелері мен ұқсас ауруы бар науқастар арасында салыстырмалы талдау жүргізілді. RYR2-де c.A13886T жаңа гетерозиготалы емес синонимдік нұсқасы анықталмады. Бұл VUS мутациясының (c.A13886T; p.D4629V) патогенді болу ықтималдығын көрсетеді.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Были получены линии ИПСК клеток на основе CytoTune™-iPS 2 Sendai Reprogramming Kit. Определен протокол дифференцировки кардиомиоцитов из ИПСК. Электрофизиологическое исследование и подтверждение фенотипической характеристики мутации на полученных кардиомиоцитах планируется провести на основе технологии MEA (multiwell microelectrode array) Maestro EdgeДля функциональной оценки патогенности генетических вариантов с неясной значимостью (VUS) был проведен сравнительный анализ членов семьи пробанда и пациентов с аналогичным заболеванием. Новый гетерозиготный несинонимичный вариант c.A13886T в RYR2 не был обнаружен. Это говорит о большей вероятности что мутации VUS (c.A13886T; p.D4629V) является патогенной

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : iPSC ұяшық сызықтары CytoTune™-iPS 2 Sendai қайта бағдарламалау жинағы негізінде алынды. Кардиомиоциттерді iPSC-ден дифференциациялау хаттамасы анықталды. Маңыздылығы түсініксіз генетикалық нұсқалардың патогенділігін функционалдық бағалау үшін MEA (көп түтік микроэлектродтар массиві) негізінде электрофизиологиялық зерттеу және алынған кардиомиоциттерге мутацияның фенотиптік сипаттамаларын растау жоспарлануда (VUS), пробандтың отбасы мүшелері мен ұқсас ауруы бар науқастарға салыстырмалы талдау жүргізілді. RYR2-де c.A13886T жаңа гетерозиготалы емес синонимдік нұсқасы анықталмады. Бұл VUS мутациясының (c.A13886T; p.D4629V) патогенді болу ықтималдығын көрсетеді.

Level of implementation (in Russian) : Не предусмотрено

Level of implementation (in Kazakh) : Енгізілмеген

Efficiency (in Russian) : Молекулярно-генетические методы исследования (таргетное секвенирование, получение плюрипотентных стволовых клеток из соматических клеток пациента) являются полезными инструментами для определения функциональной значимости впервые выявленных мутаций и позволяют лучше понять фундаментальные основы развития аритмии, оценить вклад мутаций в фенотип заболевания (клиническое течение).

Efficiency (in Kazakh) : Молекулалық-генетикалық зерттеу әдістері (мақсатты секвенирлеу, пациенттің соматикалық жасушаларынан плюрипотентті дің жасушаларын алу) жаңадан анықталған мутациялардың функционалдық маңыздылығын анықтаудың пайдалы құралы болып табылады және аритмияның дамуының іргелі принциптерін түсінуге және мутациялардың мутацияға қосқан үлесін бағалауға аурудың фенотип (клиникалық ағымы) мүмкіндік береді

Field of application (in Russian) : Медицина (кардиология), молекулярная биология

Field of application (in Kazakh) : Медицина (кардиология), және молекулалық биология