Inventory number IRN Number of state registration
0323РК00682 AP19577309-KC-23 0123РК00162
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 24949460.71 AP19577309
Name of work
Детекция вируса оспы обезьян на основе биосенсора электрохимической импедансной спектроскопии
Type of work Source of funding Report authors
Applied Канаева Дамира Ашимхановна
2
0
1
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) Нет
Full name of the service recipient
Nazarbayev University
Abbreviated name of the service recipient NU
Abstract

Оспа обезьян (monkeypox virus, MPXV) представляет собой оболочечный двухцепочечный ДНК-вирус, передаваемый от животных, принадлежащий к роду Orthopoxvirus. Последние данные свидетельствуют о том, что заболеваемость MPXV в неэндемичных странах увеличивается. Белок MPXV A29 расположен на оболочке вируса и играет ключевую роль в репликации вируса, слиянии вируса с мембраной клетки-хозяина и выходе вируса. Он считается важнейшим белком-мишенью для иммуноанализов, нацеленных на вирус MPXV.

Маймыл шешегінің вирусы (MPXV) – Orthopoxvirus тұқымдасына жататын, жануарлардан берілетін, конверттелген, қос тізбекті ДНҚ вирусы. Соңғы деректер MPXV ауруының эндемиялық емес елдерде артып келе жатқанын көрсетеді. MPXV A29 ақуызы вирустық конвертте орналасқан және вирустың репликациясында, вирустың жасушалық мембранамен қосылуында және вирустың шығуында маңызды рөл атқарады. Ол MPXV бағытталған иммундық талдаулар үшін маңызды ақуыз нысанасы болып саналады.

В 2023 г. целью нашего проекта являлось подбор чувствительного элемента распознавания к белку A29 MPXV.

2023 жылы жобамыздың мақсаты MPXV A29 ақуызы үшін сезімтал тану элементін таңдау болды.

Оценка эффективности элементов распознавания производилась с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и поверхностного плазмонного резонанса (ППР).

Тану элементтерінің тиімділігі ферментпен байланысты иммуносорбентті талдау (ИФА) және беттік плазмонды резонанс (SPR) көмегімен бағаланды.

Целью исследования была оптимизация ELISA для обнаружения белка MPXV A29. Кроме того, с использованием GraphPad был выполнен однофакторный дисперсионный анализ для расчета значений p для различных концентраций антитела. Этот тест использовался для сравнения каждой концентрации с самой высокой (1000 нг/мл). Статистическая значимость была очевидна до концентрации 250 нг/мл. После тестирования различных концентраций антител было обнаружено, что оптимальной концентрацией является 500 нг/мл. При анализе чувствительности наблюдалась линейная корреляция между концентрацией белка и оптической плотностью в диапазоне от 15 до 1500 нг/мл. Было составлено уравнение регрессии, и возникла сильная корреляция (R2 = 0,9264). Анализ специфичности показал значительные различия между MPXV A29 и нецелевыми белками (MPXV-L1R и S белком RBD SARS-CoV-2) с p

Зерттеу MPXV A29 ақуызын анықтау үшін ИФА оңтайландыруға бағытталған. Сонымен қатар, антидененің әртүрлі концентрациялары бойынша p-мәндерін есептеу үшін GraphPad көмегімен бір жақты ANOVA орындалды. Бұл сынақ әрбір концентрацияны ең жоғары концентрациямен (1000 нг/мл) салыстыру үшін қолданылады. Статистикалық маңыздылық 250 нг/мл концентрацияға дейін айқын болды, одан жоғары p-мәндері маңыздылығын жоғалтты. Әртүрлі антиденелер концентрациясын сынағаннан кейін 500 нг/мл оңтайлы концентрация екені анықталды. Сезімталдық талдауында 15-тен 1500 нг/мл аралығындағы ақуыз концентрациясы мен сіңіру арасындағы сызықтық корреляция байқалды. Регрессия теңдеуі құрылды және күшті корреляция болды (R2 = 0,9264). Ерекшелік талдауы MPXV A29 мен мақсатты емес ақуыздар (MPXV-L1R және SARS-CoV-2 RBD протеині) арасында әр салыстыру үшін p< 0,0001 болатын маңызды айырмашылықтарды көрсетті, бірақ VACV A27L емес. Зерттеулер көрсеткендей, MPXV және VACV айтарлықтай ұқсастықты көрсетеді, MPXV вирустық ядросының нуклеотидтер тізбегі VACV нуклеотидтерінің тізбегіне 96,3% ұқсастығы бар. Biacore X100 бойынша одан әрі SPR зерттеулері EDC/NHS көмегімен беттік активтендіруге және антиденелермен әрі қарай функционалдықтандыруға және этаноламин-HCl блоктауға негізделген CM5 чипінің көмегімен орындалды. Сыналған молекулалардың кинетикалық параметрлері Biaevaluation талдау бағдарламалық құралының көмегімен есептелді.

В исследовании будет разработан быстрый и чувствительный биосенсор для обнаружения белка A29 MPXV на основе технологии EIS. Мы считаем, что результаты этого предлагаемого исследования будут иметь большое социальное и экономическое влияние не только в Казахстане, но и в глобальном масштабе, поскольку разработка инструментов быстрого и чувствительного обнаружения становится все более важной в настоящее время. Более того, методология и датчик, которые будут разработаны в предлагаемом исследовании, могут быть адаптированы к другим возникающим инфекционным заболеваниям.

Бұл EIS технологиясында негізделген A29 MPXV ақуызын жылдам және сезімтал анықтау үшін биосенсорді әзірлейді . Бұл ұсынылған зерттеудің нәтижелері Қазақстанда ғана емес, сонымен қатар жаһандық ауқымда үлкен әлеуметтік және экономикалық әсер етеді деп сенеміз, өйткені қазіргі уақытта жылдам және сезімтал анықтау құралдарын дамыту маңыздырақ болып отыр. Сонымен қатар, ұсынылатын зерттеуде әзірленетін әдістеме мен сенсорды басқа дамып келе жатқан жұқпалы ауруларға бейімдеуге болады.

Не внедрено.

Енгіздірілмеген.

Использованные методы были эффективно подобраны для решения поставленных задач согласно проделанному литераторному обзору.

Өткізілген әдебиеттерді шолуға сәйкес тағайындалған мәселелерді шешу үшін қолданылатын әдістер тиімді таңдалды.

молекулярная биология, биоинженерия.

молекулалық биология, биоинженерия.

UDC indices
577.2.08, 573.6
International classifier codes
34.57.00;
Key words in Russian
обезьянья оспа; быстрая детекции; биосенсор; белок А29; электрохимическая импедансная спектроскопия;
Key words in Kazakh
маймыл шешек; жылдам анықтау; биосенсор; А29 ақуызы; электрохимиялық кедергі спектроскопиясы;
Head of the organization АДЕСИДА ИЛЕСАНМИ PhD / Профессор
Head of work Канаева Дамира Ашимхановна Ph.D. в клеточной и молекулярной биологии / Ассистент Профессор