The object of research, development or design (in Russian) : ДНК и образцы цельной крови крупного и мелкого рогатого скота.

The object of research, development or design (in Kazakh) : Ірі қара мен ұсақ малдың ДНҚ-сы және толық қан үлгілері.

Aim of work (in Russian) : Разработка ПЦР тест-системы в режиме реального времени для видовой идентификации анаплазм, распространенных среди мелкого рогатого скота и сбор 2500 образцов крови от крупного рогатого скота (КРС) и 2500 образцов крови от мелкого рогатого скота (МРС) из южных регионов Казахстана неблагополучных по анаплазмозу.

Aim of work (in Kazakh) : Ұсақ мал арасында таралған анаплазмаларды түрлік сәйкестендіру үшін нақты уақыт режимінде ПТР тест-жүйесін әзірлеу және анаплазмоз бойынша қолайсыз болып табылатын Қазақстанның оңтүстік өңірлерінен ірі қара малдан 2500 қан үлгісін және ұсақ малдан 2500 қан үлгісін жинау.

Методы исследования (на русском) : Были использованы молекулярно-генетические методы исследований

Методы исследования (на казахском) : Зерттеуде молекулалық-генетикалық әдістер қолданылды.

Obtained results and novelty (in Russian) : Разработаны, синтезированы, очищены праймеры и флуоресцентно-меченые зонды, разработана ПЦР тест-система в режиме реального времени для выявления и видовой идентификации анаплазм, распространенных среди МРС. Для разработки ПЦР тест-системы для выявления Anaplasma ovis были использованы праймеры подобранные к нуклеотидной последовательности groEL гена. На основании оптимизированных условий была разработана тест-система для выявления и видовой идентификации A. ovis. Оценка специфичности ПЦР тест-систем была проведена на 50 образцах ДНК, выделенных из цельной крови МРС. Из них 36 образцов были отрицательными, остальные 14 содержали ДНК A. ovis. Для проверки чувствительности ПЦР тест-системы целевой ген A. ovis был клонирован в плазмиды, разведение которых использовали при проверке чувствительности. Нижний предел чувствительности разработанной тест-системы составила от 10 до 30 копий в реакции. Проведен сбор 2500 образцов крови от КРС и 2500 образцов крови от МРС из 5 областей южного Казахстана неблагополучных по анаплазмозу. После поступления пробы центрифугировали при 3 000 об/мин в течение 5 минут после добавления к форменным элементам крови буфера для лизирования эритроцитов и центрифугироания получали лейкоцитарный осадок. Лейкоцитарные осадки образцов крови использовали для выделения ДНК. Всего в отчетный период было собрано 2500 образцов крови от КРС и 2500 образцов крови от МРС из которых выделена ДНК и сформирована коллекция ДНК.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : Ірі қара мал арасында кең таралған анаплазмаларды анықтау және түрлердін әртүрлілігін сәйкестендіру үшін нақты уақыт режимінде ПТР сынақ жүйесіне арналған, праймерлер мен флуоресцентті таңбаланған зондтар әзірленді. Anaplasma ovis анықтауға арналған, ПТР тест жүйесін әзірлеу үшін groEL генінің нуклеотидтер тізбегіне сәйкес келетін праймерлер пайдаланылды. Нақты уақыт режимінде ПТР тест жүйесі әзірленіп оның ерекшелігіне бағалау жүргізілді. Сынақ жүйелерінің ПТР ерекшелігін бағалау, ұсақ малдың толық қанынан оқшауланған 50 ДНҚ үлгісінде жүргізілді. 50 ДНҚ-дан 36 теріс, 14 ДНҚ үлгісі оң нәтиже A. ovis көрсетті. Сынақ жүйесінің ПТР сезімталдығын тексеру үшін A.ovis мақсатты гені плазмидаға клондалды. Әзірленген тест жүйесінің сезімталдығының төменгі шегі реакцияда 10-нан 30 данаға дейін болды. Анаплазмоз бойынша қолайсыз болып табылатын 5 онтұстік облыстарынан 2500 ірі қара мал және 2500 ұсақ мал қан үлгілері жиналды. Қан үлгісі түсісімен эритроциттерді лизистейтін буфер құйылды. Арнайы сорбент арқылы ДНҚ экстракциясы үшін қан үлгілерінен алынған лейкоциттердің шөгінділері пайдаланылды. Жалпы есеп беру кезеңінде ірі қара малдан 2500, ұсақ малдан 2500 қан сынамасы алынып, одан ДНҚ бөлініп, ДНҚ топтамасы қалыптастырылды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Разработанные ПЦР тест-системы позволяют выявлять ДНК Anaplasma spp. и проводить выявление и видовую идентификацию Anaplasma ovis.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Әзірленген ПТР сынақ жүйелері Anaplasma spp ДНҚ-сын анықтауға мүмкіндік береді және Anaplasma ovis түрлерін анықтауға мүмкіндік береді.

Level of implementation (in Russian) : Не внедрено

Level of implementation (in Kazakh) : Іске асырылмаған

Efficiency (in Russian) : Разработанные ПЦР тест-системы обладают высокой специфичностью и чувствительностью и позволяют проводить выявление Anaplasma spp. и видовую идентификацию Anaplasma ovis

Efficiency (in Kazakh) : Әзірленген ПТР сынақ жүйелері жоғары спецификалық және сезімталдыққа ие және Anaplasma spp. анықтауға және Anaplasma ovis түрлік әртүрлілігін анықтауға мүмкіндік береді.

Field of application (in Russian) : Ветеринарная диагностика

Field of application (in Kazakh) : Ветеринарлық диагностика