Inventory number IRN Number of state registration
0323РК00789 AP14870156-KC-23 0122РК00274
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Краткие сведения Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Patents Amount of funding Code of the program
0 30083055.2 AP14870156
Name of work
Получение продуцентов моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций
Type of work Source of funding Report authors
Applied Боровиков Сергей Николаевич
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Объектом исследования являются продуценты моноклональных антител к PD-L1 и CTLA-4 рецепторам коров предназначенные для лечения хронических вирусных и бактериальных инфекций

Зерттеу нысаны созылмалы вирустық және бактериялық жұқпалы аурулды емдеу үшін арналған ірі қара малдың PD-L1 және CTLA-4 рецепторларына қарсы моноклоналды антиденелердің продуценттері болып табылады.

Целью 2023 году является получение штаммов гибридных клеток продуцирующих моноклональные антитела против внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота.

Ірі қара малдың иммунндық жүесі жасушулардың PD-L1 және CTLA-4 рецепторларына қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасушалар штамдарын алу 2023 жылдың мақсаты болып табылады.

В процессе работы использовались методы генной инженерии и иммунологические, иммунохимические, биохимические и биотехнологические методы исследования.

Жұмыс барысында гендік инженерия әдістері, сонымен қатар иммунологиялық, биохимиялық және биотехнологиялық зерттеу әдістері қолданылды.

Получены перспективные клоны 1с3 и 4h8 продуцирующие mAb против rCTLA-4, и клон 3g2, продуцирующий mAb против rPD-L1 крупного рогатого скота. Константа связывания моноклональных антител (Kaff (M-1)) составила для 1c3 – 2.9×108М-1; 4h8 – 2.7×108М-1 and 3g2 – 6.4×108M-1. Для наработки препаративного количества гибридные клетки в концентрации 2х106 вводили внутрибрюшинно мышам линии BALB/с, которым за 7-10 дней до введения гибридомы был инъецирован пристан-2, 6, 10, 14-тетраметилпентадекан. Концентрация антител в образовавшейся через 12-14 дней асцитной жидкости составила 0,9 – 1 мг/мл. Антитела очищали методом высаливания сульфатом аммония до 50% насыщения с последующей аффинной хроматографией на колонке HiTrap Desalting. Новизна результатов: в первые в республике получены штаммы гибридных клеток продуцирующие моноклональные антитела против внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота.

Ірі қара малдың rCTLA-4-ке ақуызға қарсы mAb өндіретін 1c3 мен 4h8 және rPD-L1-ге қарсы mAb өндіретін 3g2 перспективті клондары алынды. Моноклоналды антиденелердің байланысу константасы (Кафф (М-1)) 1c3 үшін 2,9 × 108 M-1; 4h8 – 2,7×108M-1 және 3g2 – 6,4×108M-1 болды. Моноклоналды антиденелердің препаративті мөлшерін өндіру үшін 2x106 концентрациясындағы гибридті жасушалар BALB/c тышқандарына интраперитонеальді түрде енгізілді, гибридомаларды енгізуден 7-10 күн бұрын пристан-2, 6, 10, 14-тетраметилпентадекан енгізілді. 12-14 күннен кейін түзілген асцит сұйықтығындағы антиденелердің концентрациясы 0,9 – 1 мг/мл болды. Асцит сұйықтығынан алынған антиденелер аммоний сульфатымен 50% қанығуға дейін тұздау арқылы тазартылды, содан кейін HiTrap тұзсыздандыру бағанында ұқсастық хроматографиясы жүргізілді. Нәтижелердің жаңалығы: республикада алғаш рет ірі қара малдың иммундық жүйесі жасушаларының CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс домендеріне қарсы моноклоналды антиденелер түзетін гибридті жасушалардың штаммдары алынды.

Основные конструктивные и технико-экономические показатели: Штаммы гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела против внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота, обладают высокой продуктивностью.

Ірі қара малдың иммундық жүйе жасушаларының CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс домендеріне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасуша штаммдары жоғары өнімді.

Степень внедрения: Проект на стадии разработки.

Жоба әзірлеу сатысында.

Эффективность определяется высокой продуктивностью штаммов гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела против внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота и высокой специфичностью и чувствительностью моноклональных антител.

Тиімділік ірі қара малдың иммундық жүйе жасушаларының CTLA-4 және PD-L1 рецепторларының жасушадан тыс домендеріне қарсы моноклоналды антиденелерді өндіретін гибридті жасуша штаммдарының жоғары өнімділігімен және моноклоналды антиденелердің жоғары спецификалық және сезімталдық қасиеттерімен анықталады.

Ветеринария

Ветеринария.

UDC indices
57.088.2; 571.27;619
International classifier codes
34.43.17;
Key words in Russian
рекомбинантный антиген; CTA-4; PD-L1; моноклональные антитела; иммунитет; хронические инфекции;
Key words in Kazakh
рекомбинантты антиген; CTA-4; PD-L1; моноклоналды антидене; иммунитет; созылмалы жұқпа;
Head of the organization Искакова Айша Нурбековна Ph.D /
Head of work Боровиков Сергей Николаевич Кандидат биологических наук / доцент