Inventory number IRN Number of state registration
0223РК00230 AP09260709-OT-23 0121РК00225
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 0 Publications Web of science: 0 Publications Scopus: 0
Number of books Appendicies Sources
1 6 70
Total number of pages Patents Illustrations
75 0 25
Amount of funding Code of the program Table
22671757.6 AP09260709 7
Name of work
Разработка ИФА тест-системы для диагностики коронавируса SARS-CoV-2 на основе RBD и S белка
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied Технология
Report authors
Балтин Кайрат Канатович , Хасенов Бекболат Бауржанович , Силаев Дмитрий Витальевич , Актаева Сания Айдарбековна , Акишев Жигер Дастанович , Кирибаева Асель Калиаскаровна , Шамсиева Юлия Александровна , Мусахметов Арман Сартамбаевич ,
0
0
0
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

Объект исследований – рекомбинантные антигены S и RBD, рекомбинантный конъюгат HRP-SpA/SpG.

Зерттеу нысаны – рекомбинантты S және RBD антигендері, рекомбинантты HRP-SpA/SpG конюгаты.

Целью проекта является разработка ИФА тест-системы для диагностирования инфекционного возбудителя атипичной пневмонии COVID-19 на основе рекомбинантных гликозилированных антигенов RBD и S коронавируса SARS-CoV-2.

Жобаның мақсаты SARS-CoV-2 коронавирусының рекомбинантты гликозилденген RBD және S антигендері негізінде, COVID-19 атипті пневмониясының инфекциялық қоздырғышын диагностикалау үшін ИФТ тест жүйесін әзірлеу болып табылады.

Методы проведения работы - использовались методы молекулярной биологии, генетической инженерии, биохимии и иммунохимии.

Жұмысты орындау әдістері – молекулалық биология, гендік инженерия, биохимия және иммунохимия.

В составе плазмидных векторов были клонированы гены RBD и белка S, амплифицированные из генома коронавируса SARS-CoV-2. Получены антигены rS и rRBD, которые тестировали на сыворотках у людей с COVID19. Создана генно-инженерная конструкция кодирующая рекомбинантный конъюгат HRP-SpA/SpG, содержащая фрагменты белка А из Staphylococcus aureus и белка G из Streptococcus spp. и слитых с геном пероксидазы хрена. Получено два дрожжевых штамма секретирующих белки rHRP-SpA/SpG-GS и rHRP-SpA/SpG-SM, различающихся между собой уровнем пероксидазной активности и чувствительностью к ионам металлов. Установлено, что рН оптимум для пероксидазной активности составляет 7,0, а температурного оптимумам 40 °С. Пероксидазная активность для rHRP-SpA/SpG-SM и rHRP-SpA/SpG-GS составляет 17,2 ± 0,4 Ед/мг и 4,48 ± 0,19, соответственно. Отработаны параметры культивирования штаммов-продуцентов rRBD и rHRP-SpA/SpG в условиях глубинной ферментации в биореакторе и определены параметры выделения rRBD и rHRP-SpA/SpG. Новизна работы – впервые получены и изучены rRBD, rS и rHRP-SpA/SpG, представляющий интерес в диагностической практике.

Жұмыс нәтижесінде SARS-CoV-2 коронавирусының геномынан амплификацияланған RBD және S ақуыз гендері плазмидтік векторға клондалды. rS және rRBD антигендері COVID19 жұқтырған адамдардан алынған сарысуларында сыналған. Рекомбинантты HRP-SpA/SpG конюгатын кодтайтын гендік-инженерлік құрылым алынды, оның құрамында Staphylococcus aureus-тен А ақуызының және Streptococcus spp. G ақуызының бөліктері желкек пероксидазасының генімен біріктірілген. rHRP-SpA/SpG-GS және rHRP-SpA/SpG-SM ақуыздарын бөліп шығаратын екі ашытқы штаммдары алынды, олардың айырмашылығы пероксидаза белсенділігінің деңгейінде және металл иондарына сезімталдығы. Пероксидазалық белсенділігі үшін рН оптимумы 7,0, ал оптималды температура 40 °С екені анықталды. rHRP-SpA/SpG-SM және rHRP-SpA/SpG-GS үшін пероксидазалық белсенділік тиісінше 17,2 ± 0,4 бірлік/мг және 4,48 ± 0,19 бірлік/мг тең. Биореакторда тереңділік дақылдандыру жағдайында rRBD және rHRP-SpA/SpG продуценттік штаммдарын өсіру жағдайлары оңтайландырылып, rRBD және rHRP-SpA/SpG бөліп алу жағдайлары анықталды. Жұмыстың өзектілігі диагностикалық тәжірибеде қызығушылық тудыратын rRBD, rS және rHRP-SpA/SpG алынып, алғаш рет зерттелді.

Разработан ИФА набор по выявлению антител против RBD коронавируса SARS-CoV-2.

SARS-CoV-2 коронавирусының RBD қарсы антиденелерді анықтауға арналған ИФТ жинағы әзірленді.

Рекомендации по внедрению – технология имеет высокую перспективу внедрения и коммерциализации на предприятиях по производству диагностических тест-систем.

Енгізу бойынша ұсыныстар – диагностикалық тестілеу жүйелерін шығаратын кәсіпорындарда технологияны енгізу және коммерцияландыру мүмкіндігі жоғары

Эффективность результатов проекта заключается в разработке инновационной диагностической тест-ситемы.

Жоба нәтижелерінің тиімділігі инновациялық диагностикалық тест жүйесін әзірлеу болып табылады.

Область применения – биотехнология.

Қолдану аясы – биотехнология.

UDC indices
578.74.578.834.1;543.94
International classifier codes
34.43.00; 62.37.43;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
Антиген; ИФА; Вирус; Конъюгат; Белок; Диагностика;
Key words in Kazakh
Антиген; ИФТ; Вирус; Конъюгат; Ақуыз; Диагностика;
Head of the organization Искакова Айша Нурбековна Ph.D /
Head of work Балтин Кайрат Канатович Кандидат биологических наук / Ассоциированный профессор
Native executive in charge