Inventory number IRN Number of state registration
0223РК00379 AP09259102-OT-23 0121РК00194
Document type Terms of distribution Availability of implementation
Заключительный Gratis Number of implementation: 0
Not implemented
Publications
Native publications: 0
International publications: 1 Publications Web of science: 1 Publications Scopus: 1
Number of books Appendicies Sources
1 8 44
Total number of pages Patents Illustrations
88 0 20
Amount of funding Code of the program Table
23000000 AP09259102 7
Name of work
Генетическая характеризация изолятов вируса блютанга, выявляемых в Казахстане, и разработка отечественной тест-системы для их дифференциальной детекции
Report title
Type of work Source of funding The product offerred for implementation
Applied Методическая документация
Report authors
Мамадалиев Сейдигапбар , Жигайлов Андрей Викторович , Скиба Юрий Александрович , Мальцева Элина Романовна , Низкородова Анна Сергеевна , Остапчук Екатерина Олеговна , Перфильева Юлия Викторовна , Бердыгулова Жанна Амировна , Найзабаева Динара Адамжанқызы , ҚУАТБЕКОВА САЛТАНАТ ӘЛІМБЕКҚЫЗЫ , Иванова Карина Руслановна ,
0
2
2
0
Customer МНВО РК
Information on the executing organization
Short name of the ministry (establishment) МНВО РК
Full name of the service recipient
Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Abbreviated name of the service recipient ТОО "Национальный центр биотехнологии"
Abstract

образцы (кровь, сыворотка) от овец, коз, коров, бухарских оленей, одногорбых верблюдов, а также мокрецы, слепни, мухи-кровососки

қой, ешкі, сиыр, бұхар бұғыларының, нар түйелердің үлгілері, ағаш биттері, жылқылардың қан сорғыш шыбындар қолданылды

Провести генетическую характеризацию изолятов вируса блютанга, выявляемых в Казахстане, и разработать отечественную тест-систему на основе ПЦР в реальном времени для их дифференциальной детекции

Қазақстанда ҚҚБ-блютанг вирусының сынамаларына генетикалық талдау жүргізу және олардың дифференциалдық анықтауы үшін нақты уақыт режимінде ПТР негізінде отандық сынақ-жүйесін әзірлеу

Компьютерный анализ последовательностей РНК и ДНК, ГИС-технологии, сбор биологического материала, выделение РНК, ИФА, обратная транскрипция, транскрипция in vitro, ПЦР, ОТ-кПЦР-РВ, секвенирование ДНК, электрофорез ДНК, методы молекулярного клонирования, статистический анализ

Нуклеотидтер тізбегіне компьютерлік талдау, ГАЖ технологиялары, биологиялық сынама жинау, РНҚ, ИФТ бөлу әдістері, кері транскрипция, in vitro транскрипция, ПТР, шектеулі уақыттағы кері транкрипциялы ПТР, нуклеин қышқылдарының электрофорезі, молекулярлы клондау әдістері, статистикалық деректерді сараптау

1) Разработаны и синтезированы праймеры для детекции и генетической характеризации BTV. Проведен сбор кровососущих насекомых-переносчиков BTV, а также крови и сывороток от овец, коз, коров и верблюдов. Проведен анализ сывороток методом ИФА, общая превалентность овец составила 6,15%. РНК, выделенные из гомогенатов двукрылых и крови животных, тестированы ОТ-ПЦР. Выявлено три ПЦР-позитивных образцов крови (0,5%) и по одному ПЦР-положительному гомогенату из мокрецов и мух-кровососок. 2) Проведено секвенирование полного генома BTV одного из изолятов, установлен серотип и топотип вируса (BTV-9W); проведен филогенетический анализ. 3) Клонированы участки сегментов Seg-2 и Seg-10 BTV-9W. Разработана тест-система для детекции РНК вируса блютанга и дифференциального выявления вакцинного штамма BTV-9W методом количественной ОТ-ПЦР в реальном времени. Оптимизирован состав смеси и условия амплификации, установлены специфичность и чувствительность набора. 4) Проведен дизайн набора, разработана инструкция по применению. Произведена пробная партия тест-набора, проведена оценка ее качества.

1) ҚҚБ-блютанг вирусын (BTV) анықтау және генетикалық сипаттау үшін праймерлер жасалынды және тізбектелді. BTV тасымалдаушы қан соратын жәндіктерді, қойлардан, ешкілерден, сиырлардан және түйелерден қан мен сарысуларды жинау жүргізілді. ИФА әдісімен сарысуларға талдау жүргізілді, қойлардың басымдылығы 6,15% құрады. Екіқанаттылардың езгілерінен және жануарлардың қанынан бөлініп алынған РНҚ НУ-ПТР арқылы тексеріледі. Үш қан үлгілері ПТР-оң (+) (0,5%) және бір қан сорғыш шыбындары мен шыбындардан алынған езгілері ПТР-оң (+) анықталды. 2) Сынамалардың бірінің толық BTV геномының секвенирлеуі жүргізілді, вирустың серотипі мен топотипі (BTV-9W) анықталды; филогенетикалық талдау жүргізілді. 3) Seg-2 және Seg-10 BTV-9W сегменттерінің аймақтары бөлінді. Блютанг вирусының РНҚ анықтау және шектеулі уақыттағы сандық НУ-ПТР әдісімен BTV-9W вакцина штаммын дифференциалды анықтау үшін сынақ жүйесі әзірленді. Қоспаның құрамы мен амплификация шарттары ыңғайландырылды, жиынтықтың ерекшелігі мен сезімталдығы анықталды. 4) Жиынтықтың дизайны жүргізілді, қолдану жөніндегі нұсқау әзірленді. Сынақ-жиынтығы әзірленді және оның сапасы анықталды

Разработан отечественный набор для детекции РНК BTV с возможностью выявления вакцинного штамма девятого серотипа вируса. Нуклеотидные последовательности BTV и векторов депонированы в GenBank. Получены ДНК-конструкции, несущие участки генома BTV-9W, используемые как контроли ПЦР. Результаты повысят эффективность контроля блютанга в Казахстане.

BTV вакцина штаммының 9 серотиптік вирусының РНҚ-ын анықтау және талдауға арналған отандық балама жиынтық әзірленді. BTV және векторлардың нуклеотидтер тізбегі GenBank-те сақталған. ПТР бақылауы ретінде пайдаланылатын BTV-9W геномының бөліктерін тасымалдайтын ДНҚ құрылымдары алынды. Нәтижелер Қазақстандағы ҚҚБ-блютангқа қатысты бақылау жүргізудің тиімділігін арттырады.

Все запланированные работы выполнены в полном объеме и в срок.

Барлық жоспарланған жұмыстар толық көлемде және мерзімінде орындалды.

Эпидемиология, диагностика в сельском хозяйстве.

Эпизоотология, балама саласы.

UDC indices
578.823.1: 577.21 : 616.98 : 616.079
International classifier codes
62.00.00;
Readiness of the development for implementation
Key words in Russian
катаральная лихорадка овец; вирус блютанга; секвенирование; полимеразная цепная реакция; тест-система;
Key words in Kazakh
Қойлардың қабыну безгегі; блютанг вирусы; секвенирлеу; полимеразды тізбекті реакция; тест жүйесі;
Head of the organization Искакова Айша Нурбековна Ph.D. /
Head of work Мамадалиев Сейдигапбар Доктор ветеринарных наук / Профессор, академик НАЕН РК
Native executive in charge Жигайлов Андрей Викторович Ассоциированный профессор