The object of research, development or design (in Russian) : CRISPR/Cas13, Tomato Bushy Stunt Virus (TBSV)

The object of research, development or design (in Kazakh) : CRISPR/Cas13, Tomato Bushy Stunt Virus (TBSV)

Aim of work (in Russian) : Целью проекта является температурная оптимизация CRISPR/Cas13 системы для повышения резистентности растений к вирусным инфекциям. Также будет исследовано влияние супрессорного белка - Р19 на эффективность системы CRISPR/Cas13.

Aim of work (in Kazakh) : Жобаның мақсаты – өсімдіктердің вирустық инфекцияларға төзімділігін арттыру үшін CRISPR/Cas13 жүйесін температура арқылы оңтайландыру. Р19 супрессорлық ақуызының CRISPR/Cas13 жүйесінің тиімділігіне әсері де зерттелетін болады.

Методы исследования (на русском) : LR Gateway клонирование, LLP, трансформация, иммуноблот, SDS PAGE, агроинфильтрация, DAB

Методы исследования (на казахском) : LR Gateway клондау, LLP, трансформация, иммуноблот, SDS PAGE, агроинфильтрация, DAB

Obtained results and novelty (in Russian) : 1) Изучено in planta ингибирование вируса кустистой карликовости томатов (TBSV) дикого типа и его мутанта RMJ-1 в присутствии системы CRISPR/Cas13. Созданы конструкции pk2GW7-рСas13 и crРНК нацеленные на супрессорный белок Р19 и репортерный белок GFP. Конструкции были доставлены методом агробактериальной инфильтрации в N. benthamiana. Эффективность образования комплекса Cas13-crРНК оценена жидко-жидкостным разделением фаз. 2)Изучена динамика теплового воздействия на уровень генерации АФК, антиоксидантной защиты и экспрессии шаперонных белков в растениях N. benthamiana. Были определены оптимальные количества циклов коротких тепловых обработок. Оптимальная температура была определена путем оценки накопления АФК и продукции белков теплового шока Hsp-90, Hsp-70.

Obtained results and novelty (in Kazakh) : 1) CRISPR/Cas13 жүйесінің қатысуымен жабайы типті қызанақ бұталы ергежейлі вирусының (TBSV) және оның мутантты RMJ-1 in planta тежелуі зерттелген. pk2GW7-pCas13 және crRNA құрылымдары P19 супрессорлық ақуызна және GFP репортер ақуызына бағытталған. Конструкциялар N. benthamiana-ға Agrobacterium инфильтрациясы арқылы жеткізілді. Cas13-crRNA кешенінің түзілу тиімділігі сұйық-сұйық фазаны бөлу арқылы бағаланды. 2) N. benthamiana өсімдіктеріндегі ROS генерациясының деңгейіне, антиоксидантты қорғауға және шаперон белоктарының экспрессиясына жылу әсерінің динамикасы зерттелді. Қысқа термиялық өңдеу циклдерінің оңтайлы сандары анықталды. Оңтайлы температура ROS жинақталуын және Hsp-90 және Hsp-70 жылу соққысының ақуыздарын өндіруді бағалау арқылы анықталды.

The main constructive and technical economic indicators (in Russian) : Экономическим эффектом результатов проекта является технология, которая позволит получать сельскохозяйственные организмы с целевыми признаками, что будет способствовать повышению продуктивности, и снижению себестоимости продукции. Научно-технический эффект результатов проекта заключается в получении новых фундаментальных данных о комбинированном стрессе взаимодействии вируса, растения и температуры с применением технологии редактирования генома.

The main constructive and technical economic indicators (in Kazakh) : Жоба нәтижелерінің экономикалық тиімділігі мақсатты белгілері бар ауылшаруашылық организмдерін алуға мүмкіндік беретін технология болып табылады, бұл өнімділікті арттыруға және өнімнің өзіндік құнын төмендетуге көмектеседі. Жоба нәтижелерінің ғылыми-техникалық әсері геномды өңдеу технологиясын қолдана отырып, вирустың, өсімдіктің және температураның біріктірілген стресстік әрекеттесулері туралы жаңа іргелі деректерді алу болып табылады.

Level of implementation (in Russian) : Ожидаемые результаты внесут вклад в развитие в Казахстане технологии редактирования генома.

Level of implementation (in Kazakh) : Күтілетін нәтижелер Қазақстанда геномды өңдеу технологиясының дамуына ықпал етеді.

Efficiency (in Russian) : заключается во влиянии результатов на биологическую науку и образование в Казахстане.

Efficiency (in Kazakh) : нәтижелерінің Қазақстандағы биология ғылымы мен біліміне әсері болып табылады.

Field of application (in Russian) : Область применения: научные исследования в области вирусологии растений, биологии, биотехнологии растений.

Field of application (in Kazakh) : Қолдану аясы: өсімдіктер вирусологиясы, биологиясы, өсімдіктер биотехнологиясы саласындағы ғылыми зерттеулер.